公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究,;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:c-MET激酶抑制劑(INCB28060)
英文名稱:INCB28060
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
INCB28060是一種有效的選擇性c-MET激酶抑制劑,。INCB28060抑制c-MET激酶活性,,平均IC50為0.13nM。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:1029712-80-8 別名:Capmatinib;INC-280 純度:99.78% 分子量:412.42 儲存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用,。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
羅氏鏈霉菌磷化蛋白激C mu型抗體Anti-c-Fos/FOS Antibodyvav3鳥嘌呤核苷交換因子(VAV3)
金黃色葡萄球菌前纖維蛋白1抗體Anti-Bub1 AntibodyUV切除修復(fù)蛋白RAD23同源物A(RAD23A)
總狀毛霉增殖核抗原抗體Anti-BUB3 AntibodyU1小核核糖核蛋白A(SNRPA)
枯草芽孢桿菌磷化粘著斑激抗體Anti-C-SKI(SKI) AntibodyT特異性鳥苷三磷(Tgtp)
三葉草根瘤菌磷化粘著斑激抗體Anti-C1QBP AntibodyT受體(TCR)
密二糖假絲酵母磷化p21激活激1抗體Anti-C3 AntibodyT急性淋巴母白血病相關(guān)抗原(TALLA-1/CD231)
泡盛曲霉磷化3磷肌依賴性蛋白激1抗體Anti-C3(Complement C3) AntibodyT活化連接蛋白(LAT)
蠟狀芽孢桿菌磷化3磷肌依賴性蛋白激1抗體Anti-C4A(Complement C4-A) AntibodyT表面糖蛋白CD1a(CD1A)
球孢白僵菌磷化3磷肌依賴性蛋白激1抗體Anti-C5 AntibodyTU3A蛋白(TU3A)
馬腺疫鏈球菌獸疫亞種磷化磷酯Cγ1抗體Anti-C5 AntibodyTrem樣轉(zhuǎn)錄因子1(TREML1)
大豆慢生根瘤菌磷化磷酯Cγ2抗體Anti-C5a-R/C5ar1 AntibodyTraf2結(jié)合蛋白(T2BP)
卷枝毛霉卷枝變型磷化樁蛋白Paxillin抗體Anti-C5 AntibodyToll作用蛋白(TOLLIP)
松雙毛殼孢磷化樁蛋白Paxillin抗體Anti-C7 AntibodyToll樣受體9(TLR-9/CD289)
根瘤菌磷化樁蛋白Paxillin抗體Anti-C9 AntibodyToll樣受體7(TLR7)
平凡假單胞菌磷化蛋白激C β1/β2(Thr500)抗體Anti-C9 AntibodyToll樣受體6(TLR6)
植物乳桿菌植物亞種孕激受體膜相關(guān)元件抗體Anti-CA1 AntibodyToll樣受體5(TLR5)
稻生黃單胞菌(無法提供)Xanthomonas│oryzae pv.oryzae (Ishiyama) 質(zhì)量規(guī)格:0.97
皮氏無色桿菌Achromobacter│piechaudii 質(zhì)量規(guī)格:0.97
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:0.98
c-MET激酶抑制劑(INCB28060)新月梅奇酵母 抗氧劑1076巨噬炎性蛋白-1αElisa
樟疫霉 2-噻吩乙卵清蛋白特異性IgE抗體Elisa
盞芝小孔 5-溴吡啶-3-甲酸球蛋白EElisa
E.coli DB3.1 3-延胡酸氨基酯球蛋白GElisa
芭蕉本森頓酵母 2-溴異丁酰溴球蛋白MElisa
河北鏈霉 (R)-(-)-扁桃酸甲酯膜攻擊復(fù)合物Elisa
秦氏蜜環(huán) 5-溴戊酸內(nèi)皮1Elisa
大豆慢生根瘤 3-氨基苯酸內(nèi)皮轉(zhuǎn)化1Elisa
諾爾斯氏鏈霉 苯氧乙酸甲酯黏蛋白Elisa
產(chǎn)氮假單胞 4-丁基前列環(huán)Elisa
釀酒酵母 水楊酸丁酯前列腺E2Elisa
鮭色鎖擲酵母 2-溴聯(lián)苯前列腺特異性抗原Elisa
小麥全蝕病 MRS肉湯羥脯氨酸Elisa
節(jié)桿 雙歧桿BS培養(yǎng)基趨化因子配體21Elisa
美麗鹽單胞 化血紅趨化因子配體25Elisa