β-酮酰還原酶(KR)抑制劑(GSK2194069)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-phospho-SHC (Tyr239/240)/FITC 熒光素標記磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
VTG(vitellogenin) 青鳉魚卵黃蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1mg
細胞核因子/k基因結(jié)合核因子抗體

以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3）凍存液：90%血清,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,，液氮儲存,。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。

對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM,，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）,。

2) 對于懸浮細胞,，500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞,，要用不含EDTA的胰酶消化細胞,，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,，加入細胞培養(yǎng)液,，將細胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),，500-1000g離心5min收集細胞,。

3) 收集細胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,，離心收集細胞,，共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,，重懸細胞,，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中,，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,，輕輕混勻，室溫避光孵育15min,。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測：

染色孵育后,，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,，繪制雙色散點圖（two-color dot plot）,，F(xiàn)ITC為橫坐標，PI為縱坐標,。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光,。

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI,。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,，細胞核顯示紅色,，膜上有綠色光環(huán)。

紅色鹽幾何形菌Lysinibacillus sphaericus魚孕激/孕

構(gòu)巢曲霉Lysinibacillus sphaericus鮭魚降鈣(SCT)

玫瑰單胞菌Bacillus thuringiensis鮭魚降鈣(SCT)

釀酒酵母Bacillus thuringiensis魚類甲狀腺(T4)

蘑菇屬Bacillus thuringiensis魚類甲狀腺(T4)

舌狀炭角菌Bacillus thuringiensis魚雌二

澳型核果褐腐病菌Bacillus thuringiensis魚雌二

根霉Bacillus thuringiensis魚促腎上腺皮質(zhì)激

蒼白色鏈霉菌Bacillus thuringiensis魚促腎上腺皮質(zhì)激

空腸彎曲桿菌Bacillus thuringiensis魚雌激

蘇云金芽胞桿菌柏氏變種Bacillus thuringiensis魚雌激

香菇*Bacillus thuringiensis魚促卵泡

棒束青霉Bacillus thuringiensis魚促卵泡

湖北擬酵母Bacillus thuringiensis魚促黃體激

秀珍菇Bacillus thuringiensis魚促黃體激

枯草芽孢桿菌Bacillus thuringiensis魚磷化腺苷活化蛋白激

磷化細胞核因子/k基因結(jié)合核因子p100抗體瓜硫桿狀菌

磷化1型神經(jīng)纖維瘤抗體瓜枝孢（黃瓜黑星病菌）痢疾志賀菌

磷化細胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體玉蜀黍赤霉（麥類赤霉病菌）紅城紅球菌

磷化谷受體2B抗體第九矛束霉擬威克酵母
β-酮酰還原酶(KR)抑制劑(GSK2194069)SPTLC2 英文名稱： 絲酸棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶2抗體 0.2ml

Phospho-EGFR(Tyr845) 英文名稱： 磷酸化表皮生長因子受體抗體 0.1ml

轉(zhuǎn)移生長因子–α抗體 Anti-TGF-α 0.1ml

Anti-TLR4/FITC 熒光素標記Toll樣受體4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Lck (Tyr505) 磷酸化淋巴細胞特異性蛋白酪氨酸激酶抗體 規(guī)格 0.1ml

BCHE(butyrylcholinesterase)CT 丁酰膽堿脂酶抗原(C端)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg