公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究,;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:NF-kB抑制劑
英文名稱:Pyrrolidinedithiocarbamate ammonium
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
英文名稱:Pyrrolidinedithiocarbamate ammonium 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|100mg Pyrrolidinedithiocarbamate ammonium是選擇性的NF-kB抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號(hào):5108-96-3 別名:Ammonium pyrrolidinedithiocarbamate;APDC;1-Pyrrolidinedithiocarboxylic acid ammonium salt 純度:98.0% 分子量:164.29 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用,。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3,、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
大腸埃希菌磷化堿性成纖維生長因子受體1抗體Human YTHDC1 ELISA Kit雞雌二(E2)免疫試劑盒
韓國梅奇酵母FAM65B蛋白抗體Human ZBTB37 ELISA Kit雞傳染性支氣管炎(IB)抗體免疫試劑盒
美味側(cè)耳胞外分泌型絲/蘇蛋白激FAM20C抗體Human YTHDF1 ELISA Kit雞傳染性法氏囊病(IBD)抗體免疫試劑盒
平菇—CCEF89凝血因子8/第八凝血因子/第八因子相關(guān)抗原抗體Human ZBTB38 ELISA Kit雞觸珠蛋白相關(guān)蛋白(HPR)免疫試劑盒
稻黑孢纖維母生長因子受體底物3抗體Human YTHDF3 ELISA Kit雞超氧化物歧化(SOD)免疫試劑盒
扣囊復(fù)膜孢酵母纖維連接蛋白抗體Human YTHDF2 ELISA Kit雞層連蛋白/板層(LN)免疫試劑盒
金黃殼囊孢菌FCHO1蛋白抗體Human ZBTB40 ELISA Kit雞補(bǔ)體蛋白4(C4)免疫試劑盒
多主棒孢菌磷化脂肪型脂肪結(jié)合蛋白Human ZBTB44 ELISA Kit雞補(bǔ)體蛋白3(C3)免疫試劑盒
毛霉屬脂肪結(jié)合蛋白12抗體Human XK ELISA Kit雞補(bǔ)體3裂解產(chǎn)物(C3SP)免疫試劑盒
乙鈣不動(dòng)桿菌四連接同源蛋白FJX1抗體Human ZBTB46 ELISA Kit雞脫氫E1(PDH E1)免疫試劑盒
點(diǎn)柄粘蓋牛肝G蛋白偶聯(lián)受體γ3抗體Human IGF1R(Insulin-like growth factor 1 receptor) ELISA Kit雞二單酰(malonyl CoA)免疫試劑盒
弗雷德里克斯堡假單胞菌G蛋白偶聯(lián)受體γ7抗體Human YAP1 ELISA Kit雞基轉(zhuǎn)移(ALT)免疫試劑盒
釀酒酵母G蛋白結(jié)合蛋白α13/Gα13抗體Human XKR6 ELISA Kit雞表皮生長因子(EGF)免疫試劑盒
Paraburkholderia sp.G蛋白結(jié)合蛋白α16/Gα16抗體Human YBX1(Nuclease-sensitive element-binding protein 1) ELISA Kit雞半乳糖凝集-3(Gal-3)免疫試劑盒
短小芽孢桿菌G蛋白α抑制劑抗體Human YARS2 ELISA Kit雞白血病抑制因子(LIF)免疫試劑盒
紫麥角菌G蛋白受體α x+z抗體Human CSK(Tyrosine-protein kinase CSK) ELISA Kit雞白介9(IL-9)免疫試劑盒
: AS4.62資源名稱: 紫產(chǎn)色鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:0.100mg/ml澳洲茄;澳州茄
雪白根霉Rhizopus│niveus 質(zhì)量規(guī)格:Viscosity Grade 46扁蓄苷
糙皮側(cè)耳(平菇)Pleurotus│ostreatus 質(zhì)量規(guī)格:Viscosity Grade 687-表紫杉
NF-kB抑制劑大腸埃希 (S)-1-(二苯基膦基)-2-[(S)-4-異基惡唑啉-2-基]二茂鐵胃蛋白Elisa
玫瑰庫克氏 二(4-溴苯基)胰淀粉Elisa
杰丁畢赤酵母 4-溴-2,6-二氟苯甲胰脂肪Elisa
季也蒙有孢漢遜酵母 2,4-二苯磺酰P27蛋白Elisa
異常威克漢姆酵母 1-金剛烷乙睛脂多糖結(jié)合蛋白Elisa
蘇云金芽孢桿蠟螟亞種 N-Fmoc-N'-Boc-L-2,3-二氨基酸可溶性CD14Elisa
費(fèi)雷生枝霉 Salirasib腸脂肪酸結(jié)合蛋白Elisa
乳酒假絲酵母 4-苯氧基苯磺酰超敏C反應(yīng)蛋白Elisa
大腸埃希氏桿 鹽酸芬戈莫德卵磷脂膽固?;D(zhuǎn)移Elisa
抗生鏈霉 (S)-(+)-1-[(R)-2-(二苯基膦)二茂鐵]乙基二環(huán)已基膦緊密連接蛋白Elisa
糞腸球 3,5-二叔丁基緊密連接蛋白1Elisa
尖孢鐮刀 2,6-二氟苯酸結(jié)合珠蛋白Elisa
阪崎腸桿 2-基-6-硫氧還蛋白還原Elisa
苜蓿中華根瘤 Rofecoxib核因子κB受體活化因子配基Elisa
*擬蛹蟲草 3'--2'-氟苯乙酮蛋白激R樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激Elisa