商品介紹:
NCT-501是一種茶堿類(lèi)的有效醛脫氫酶1A1(ALDH1A1)選擇性抑制劑,抑制hALDH1A1時(shí)IC50值為40nM,選擇性超過(guò)其它ALDH同工酶和其它脫氫酶(作用于hALDH1B1,hALDH3A1,和hALDH2時(shí),IC50值>57UM),。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1802088-50-1 純度:99.75% 分子量:416.52 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):ALDH1A1抑制劑(NCT-501)
英文名稱(chēng):NCT-501
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無(wú)菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻,。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無(wú)細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
核黃氧化德沃斯氏菌Rhizobium galegae大鼠26S蛋白體(26S PSM)
分枝節(jié)桿菌Rhizobium gallicum大鼠TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)
枯草芽孢桿菌Rhizobium galegae大鼠TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)
有柄樹(shù)舌靈芝(白芝)(可訂購(gòu))Rhizobium giardinii大鼠內(nèi)脂/內(nèi)臟脂肪(visfatin)
黑木耳Rhizobium huautlense大鼠內(nèi)脂/內(nèi)臟脂肪(visfatin)
地花Rhizobium hainanense大鼠原激活肽(TAP)
露濕擬漆斑菌Rhizobium leguminosarum大鼠原激活肽(TAP)
嗜糖土地芽孢桿菌Rhizobium leguminosarum大鼠補(bǔ)體因子H(CFH)
密叢毛霉Rhizobium indigoferae大鼠補(bǔ)體因子H(CFH)
醬油曲霉Rhizobium leguminosarum大鼠膀胱腫瘤抗原(BTA)
果生核盤(pán)菌Rhizobium leguminosarum大鼠膀胱腫瘤抗原(BTA)
硬結(jié)節(jié)桿菌Rhizobium leguminosarum大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子BB(PDGF-BB)
蛇孢霉屬Rhizobium leguminosarum大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子BB(PDGF-BB)
發(fā)酵畢赤酵母Rhizobium leguminosarum大鼠胃蛋白(PP)
冬蟲(chóng)夏草Rhizobium leguminosarum大鼠胃蛋白(PP)
*林肯鏈霉菌Rhizobium leguminosarum大鼠(HYD)
磷酯Cβ3水粉杯傘小鼠誘導(dǎo)型多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)OSKMZ-1(干細(xì)胞庫(kù)保藏)
磷乙胺轉(zhuǎn)移A抗體輪枝孢屬小鼠胚胎干細(xì)胞RW.4(干細(xì)胞庫(kù)保藏)
足細(xì)胞表達(dá)蛋白/轉(zhuǎn)錄因子21抗體草莖點(diǎn)霉小鼠胚胎干細(xì)胞AB2.2(干細(xì)胞庫(kù)保藏)
孕激受體抗體立枯絲核菌小鼠胚胎干細(xì)胞CE3(干細(xì)胞庫(kù)保藏)
ALDH1A1抑制劑(NCT-501)Citreicella aestuarii 羥基纖維
林生鬼傘 羥基纖維
茄鏈格孢 品紅亞硫酸鈉瓊脂
Vibrio quintilis 羥基纖維
Corallococcus sp. 15-羥基松香酸
淺紫灰鏈霉淺紫灰亞種 纖維
近似臘蘑 纖維
蓋氏海桿狀 纖維
枯草芽孢桿 熬和樹(shù)脂
耐冷冷桿 732陽(yáng)離子交換樹(shù)脂
紡錘狀鏈霉 Amberlite XAD7HP離子交換大孔吸附樹(shù)脂
釀酒酵母 金合歡
玉米大斑病 乳糖蛋白胨培養(yǎng)液
竹瘤座 大黃-8-O-葡萄糖苷
釀酒酵母 Amberlite XAD4離子交換大孔吸附樹(shù)脂