Wnt抑制劑(JW74)公司正在出售的產(chǎn)品：Phospho-FoxO1 (Ser256) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人,、大、小鼠叉頭蛋白家族1抗體IgG2,5-二-2,5-己二 99%
FOXO3A/FITC 熒光標(biāo)記轉(zhuǎn)錄因子FOXO3A抗體IgG2,5-二-3-己炔-2,5-二 99%
Phospho-FoxO3a (Ser318/321) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人,、大,、小鼠叉頭蛋白3A抗

以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO),，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度,。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。

對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM,，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細胞,，500-1000g離心5min收集細胞,。

對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞,，胰酶消化時間不宜過長或過短,，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來,，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),，500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后,，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞,，共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞,，使細胞濃度達到1×106 cell/ml,。

5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中,，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,，輕輕混勻,，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測：

染色孵育后,，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置,。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot）,，F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,，活細胞僅有很低強度的背景熒光,，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片,，顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI,。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細胞膜完整性的細胞,，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán),。
地衣芽孢桿菌小鼠鈣結(jié)合蛋白Anti-OR4B1 Antibody人二氧化(DAO)

針層孔菌屬大鼠巨噬替代激活相關(guān)化學(xué)因子1Anti-OR4C12 Antibody人二氧化(DAO)

假絲酵母人白介1αAnti-OR4C15 Antibody人環(huán)加氧2(COX-2)

皮狀假絲酵母小鼠透明質(zhì)結(jié)合蛋白Anti-OR4C3 Antibody人環(huán)加氧2(COX-2)

無小鼠嗜環(huán)蛋白/親環(huán)AAnti-OR4C16 Antibody人周期依賴性激5(CDK5)

土星形塞伯林德納氏酵母大鼠骨形成蛋白Anti-OR4D1 Antibody人周期依賴性激5(CDK5)

釀酒酵母人白介1可溶性受體ⅡAnti-OR4C6 Antibody人激肽釋放10(KLK 10)

粉紅擲孢酵母大鼠視黃結(jié)合蛋白4Anti-OR4D6 Antibody人激肽釋放10(KLK 10)

葡萄座腔菌人白介1可溶性受體ⅠAnti-OR4E2 Antibody人磷酯Cγ鏈(PLCγ1)

長孢鏈霉菌小鼠骨形成蛋白6Anti-OR4F6 Antibody人磷酯Cγ鏈(PLCγ1)

費希爾曲霉大鼠6前列腺F1aAnti-OR4F17 Antibody人神經(jīng)(NA)

瓣狀韌革菌人白介16Anti-OR4F4 Antibody人神經(jīng)(NA)

枯草芽孢桿菌枯草亞種小鼠淋巴因子Anti-OR4K2 Antibody人磷酯酰肌特異性磷酯C(PIPLC)

膠孢大鼠戊糖Anti-OR4K14 Antibody人磷酯酰肌特異性磷酯C(PIPLC)

糞腸球菌人白介13Anti-OR4K17 Antibody人磷酯C(PLC)

Pseudoduganella小鼠抗尿激/血管加壓/精加壓Anti-OR4L1 Antibody人磷酯C(PLC)

松弛肽/松弛抗體葫蘆小叢殼人慢性B細胞白血病細胞

腎胺抗體#弗吉尼亞鏈霉菌mES小鼠胚胎干細胞*培養(yǎng)液

凋亡相關(guān)蛋白1抗體辣椒疫病BI 馬血清

環(huán)指蛋白165抗體#深藍鏈霉菌大鼠脂肪間充質(zhì)干細胞
Wnt抑制劑(JW74)白囊耙齒 落葉松樹脂

冷杉囊孔 Koaburaside monomethyl ether

光黃絲膜 球花苦苷

Dyella  yeojuensis Kim et al.  鐵屎米酮

炭疽芽孢桿 5-Heptadecylresorcinol

釀酒酵母 (-)-白花前胡甲

產(chǎn)朊假絲酵母（未復(fù)核可換ACCC20060） 檉柳黃

米根霉 華良姜

深紅沙雷氏 cis-Methylisoeugenol

金黃殼囊孢 北升麻寧

林生假絲酵母 天名精內(nèi)酯酮

微小桿 3-鄰甲基槲皮

香菇 尖葉云香堿，吳茱萸

微白黃鏈霉 3,7-鄰二乙?；倘~松

假紅緣層孔 3,5-Dihydroxy-4',7-dimethoxyflav