產(chǎn)品屬性:
中文名稱:CDK8抑制劑(CCT-251921)
英文名稱:CCT-251921
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
CCT-251921是有效,選擇性的CDK8抑制劑,;IC50值為2.3nM,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號(hào):1607837-31-9 純度:98.70% 分子量:410.9 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用,。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究,;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
巴氏醋桿菌小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物Anti-OR2T11 Antibody人解整合樣金屬蛋白10(ADAM10)
根瘤菌人白介-5Anti-OR2T11 Antibody人解整合樣金屬蛋白10(ADAM10)
灰黃鏈霉菌蘇州亞種人白介4Anti-OR2T2 Antibody人基質(zhì)金屬蛋白11(MMP11)
平菇大鼠髓系觸發(fā)受體-1Anti-OR2T29 Antibody人基質(zhì)金屬蛋白11(MMP11)
Salmonella enterica subsp. indica小鼠中性粒明膠相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白Anti-OR2T35 Antibody人胸苷合成(TS)
大腸埃希菌人白介3Anti-OR2T35 Antibody人胸苷合成(TS)
根瘤菌小鼠幽門螺旋菌IgGAnti-OR2W3 Antibody人胸腺嘧啶核苷磷化(TP)
鰻斯頓氏菌大鼠膠原IAnti-OR2T3 Antibody人胸腺嘧啶核苷磷化(TP)
谷糠乳桿菌大鼠磷化蛋白激CAnti-OR2Z1 Antibody人多聚ADP核糖聚合(PARP)
貝萊斯芽孢桿菌小鼠多巴D1受體Anti-OR4A15 Antibody人多聚ADP核糖聚合(PARP)
淡黃籃狀菌人白介2可溶性受體β鏈Anti-OR3A2 Antibody人葡萄糖激(GCK)
間型莢胞腔菌大鼠磷化外信號(hào)調(diào)節(jié)激Anti-OR3A3 Antibody人葡萄糖激(GCK)
黃桿菌人白介2可溶性受體α鏈Anti-OR2Y1 Antibody人單氧化(MAO)
熒光假單胞菌小鼠腎上腺能a1A受體Anti-OR4A16 Antibody人單氧化(MAO)
釀酒酵母人白介2Anti-OR4A4P Antibody人胞漿型磷脂A2(cPLA2)
鏈格孢大鼠組織蛋白KAnti-OR4C13 Antibody人胞漿型磷脂A2(cPLA2)
環(huán)指蛋白138抗體禾頂囊殼小麥變種人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞
RH血型C糖蛋白抗體壞損尾孢EMEM(MEM+NEAA)*培養(yǎng)基:
細(xì)胞周期依賴性激抑制相關(guān)蛋白抗體中田盾殼霉人急性B淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞
RNA結(jié)合蛋白38抗體圍小叢殼人結(jié)腸癌耐紫衫藥細(xì)胞
CDK8抑制劑(CCT-251921)嗜熱鏈球 異野漆樹苷
三葉草根瘤 Ethyl 2,4,6-trihydroxybenzoate
氣生鞘氨單胞 麥角甾-4,6,8(14),22-四烯-3-酮
魯氏不動(dòng)桿 異野漆樹苷
白孢鏈霉易毀霉亞種 Ethyl 2,4,6-trihydroxybenzoate
易變鏈霉 麥角甾-4,6,8(14),22-四烯-3-酮
運(yùn)動(dòng)節(jié)桿 鐵屎米酮
多殺性巴氏桿 5-Heptadecylresorcinol
球孢白僵 吐葉
兔出血癥病 鴨嘴花堿酮
Viridibacillus arenosi 豆甾-4-烯-3,6-二酮
大腸埃希 Sitoindoside I
球孢鏈霉 蛇紋石
赤曲霉 櫻桃甙,;洋李甙
阿魏側(cè)耳 脫水長(zhǎng)葉九里香內(nèi)酯
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3,、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜,。
6,、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻,。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)