以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
商品介紹:
NS-304是一種有效的前列環(huán)素(PGI2)受體激動(dòng)劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號(hào):475086-01-2 別名:Selexipag;ACT-293987 純度:99.97% 分子量:496.62 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用,。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存,。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,,500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。
3) 收集細(xì)胞后,,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,,共洗滌兩次,。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml,。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,,輕輕混勻,,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),,F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,,顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán),。
鹽洛美利英文名稱: Lomefloxacin HCl結(jié)合轉(zhuǎn)化激活因子CITED1抗體包裝10MG
鹽馬尼地平英文名稱: Lomefloxacin HClⅡ型膠原α1蛋白/軟骨鈣抗體包裝100mg
鹽美西律(慢心率)英文名稱: Loteprednol EtabonateCSMD2蛋白抗體包裝500mg
鹽尼非卡蘭英文名稱: Loteprednol EtabonateCSMD3蛋白抗體包裝1g
鹽尼卡地平英文名稱: Lovastatin,Monacolin K鈣調(diào)神經(jīng)磷CSTP1抗體包裝250mg
鹽普拉格雷英文名稱: Lovastatin,Monacolin KCTAGE6蛋白抗體包裝1g
鹽普魯英文名稱: Lubiprostone皮膚T淋巴瘤相關(guān)抗原4抗體包裝1g
鹽曲美他英文名稱: Lypressin Acetate膜蛋白CLDND2抗體包裝25g
鹽索他洛爾英文名稱: Matrixyl Acetate含半胱和組豐富域蛋白1抗體包裝5g
鹽特拉唑英文名稱: Meclofenoxate HCl豬圓環(huán)?、蛐鸵職さ鞍装b5g
鹽替羅非班英文名稱: Meclofenoxate HCl抗菌肽CAMP抗體包裝1g
鹽維拉帕米英文名稱: Megestrol Acetate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白134抗體包裝5g
依那普利拉英文名稱: Megestrol Acetate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白69抗體包裝1g
依普利英文名稱: Melanotan ⅡAcetate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白98抗體包裝5g
*貝特英文名稱: Meloxicam卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白70抗體包裝1g
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR循環(huán)免疫復(fù)合物試劑盒鹽藥根堿;Jatrorrhizine
黃曲霉Aspergillus│flavus 質(zhì)量規(guī)格:>98%血影蛋白試劑盒銀杏內(nèi)酯C;Ginkgolide C
細(xì)腳擬青霉Paecilomyces tenuipes 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品血血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體α試劑盒葉;Folic acid
PGI2受體激動(dòng)劑(NS-304)胃動(dòng)多肽鹽曲普利啶順式異構(gòu)體(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
雷帕霉靶蛋白鹽曲唑(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
粘蛋白-1/上皮膜鹽去羥(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
髓樣分化蛋白抗原鹽柔紅霉(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
周圍神經(jīng)髓鞘蛋白2抗原鹽塞利洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
MYSM1抗原鹽噻匹定(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
MYOZ抗原鹽賽庚啶(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
煙型乙酰膽受體α7(多肽)鹽賽洛唑啉(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
干關(guān)鍵蛋白(多肽)鹽三氟拉(標(biāo)準(zhǔn)品)Human