商品介紹:
TH588是MTH1(NUDT1)高效選擇性抑制劑,IC50值5nM,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1609960-31-7 純度:98.52% 分子量:295.17 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:MTH1(NUDT1)抑制劑(TH588)
英文名稱:TH588
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3,、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無(wú)細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
尖孢鐮孢人游離狀腺原Anti-USP40 Antibody人髓磷脂堿性蛋白(MBP)
費(fèi)比恩畢赤酵母人新生甲狀腺Anti-USP38 Antibody人高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)
解脂亞羅酵母人胰島Anti-USP42 Antibody人高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)
釀酒酵母人C肽Anti-USP45 Antibody人結(jié)蛋白(Des)
巴氏微桿菌人絨毛膜促性腺激Anti-USP42 Antibody人結(jié)蛋白(Des)
暗色環(huán)紋炭團(tuán)菌人絨毛膜促性腺激βAnti-USP43 Antibody人S100蛋白(S-100)
origami 2(DE3)人促黃體激Anti-USP44 Antibody人S100蛋白(S-100)
印度洋兩面神菌人潑尼松龍Anti-USP48 Antibody人S100B蛋白(S-100B)
金色鏈霉菌人瘦Anti-USP50 Antibody人S100B蛋白(S-100B)
地衣形芽孢桿菌人苗條受體Anti-USP45 Antibody人巨噬炎性蛋白2(MIP-2)
茄鏈格孢菌人生長(zhǎng)激Anti-USP53 Antibody人巨噬炎性蛋白2(MIP-2)
麥芽糖假絲酵母人紅生成Anti-USP6NL Antibody人凝膠原蛋白(gelson)
根瘤菌人紅生成受體Anti-UTP14A Antibody人凝膠原蛋白(gelson)
地衣芽孢桿菌人β-微管蛋白Anti-VANGL1 Antibody人踝蛋白(talin)
枯草芽孢桿菌人前列腺F2αAnti-VAMP1 Antibody人踝蛋白(talin)
古巴栓孔菌人總前列腺特異抗原Anti-UTS2 Antibody人角化內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)
尾加壓2相關(guān)肽抗體多形炭角菌(斜面)人牙齦成纖維細(xì)胞
上調(diào)基因4抗體N端腐皮殼屬牛胚氣管細(xì)胞
B淋巴細(xì)胞前體蛋白1抗體灰略紅鏈霉菌新生牛睪丸支持細(xì)胞系
血管炎性蛋白2抗體維及尼鏈霉菌外周血淋巴細(xì)胞
MTH1(NUDT1)抑制劑(TH588)膠紅酵母 金黃三羧酸
釀酒酵母 2-氨基吖啶酮
乙酸鈣不動(dòng)桿 蘿卜硫苷
發(fā)酵絲孢酵母 噻唑橙
短密青霉 藜蘆
卷枝毛霉卷枝變型 堿性木
蠟樣芽胞桿 (蠟狀芽胞桿) 硫秋水仙苷
大腸埃希 羥基萘藍(lán)
豬鏈球 固紅B二磺酸萘鹽
膠孢 5(6)-羧基二乙酸熒光琥珀酰亞酯
枯草芽孢桿 輪環(huán)藤寧
直絲淡紫灰鏈霉 固紅B
海水紅色桿 龍膽山酮
彎孢節(jié)叢孢 直接N
釀酒酵母 二水還原茚三酮