公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究,;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):CK1δ/CK1抑制劑(SR-3029)
英文名稱(chēng):SR-3029
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
SR3029是一個(gè)強(qiáng)且有特異性CK1δ/CK1的抑制劑,,IC50值是97nM. 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1454585-06-8 純度:98.89% 分子量:480.45 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3,、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜。
6,、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻,。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8,、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
幼角鐮孢 3-磷甘油脫氫Anti-GPRC5C Antibody人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAG Ab)
釀酒酵母谷脫羧-65(抗原)Anti-GPRC5D Antibody人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAG Ab)
綠色木霉糖原合激-3β(多肽)Anti-GPRASP1 Antibody人抗中性粒顆粒抗體(ANGA)
凸形假單胞菌核突觸蛋白-γ抗原Anti-GPRC5B Antibody人抗中性粒顆??贵w(ANGA)
大豆慢生根瘤菌胰高血糖樣肽-1受體多肽Anti-GPRC5D Antibody人抗中性??贵w(ANA)
亞尼亞鏈霉菌慶大霉偶聯(lián)牛血清白蛋白Anti-GPRIN1 Antibody人抗中性??贵w(ANA)
芽孢桿菌屬重組-轉(zhuǎn)移Anti-GPRC6A Antibody人抗載脂蛋白抗體A1(Apo A1)
鞘單胞菌慶大霉偶聯(lián)雞卵白蛋白Anti-GPRC6A Antibody人抗載脂蛋白抗體A1(Apo A1)
皺褶假絲酵母人血清白蛋白Anti-GPRIN2 Antibody人抗胰島受體抗體(AIRA)
解淀粉芽胞桿菌人beta 亞基人絨毛膜促性腺激抗原Anti-GPS2 Antibody人抗胰島受體抗體(AIRA)
紅城紅球菌高遷移率族蛋白-1(抗原)Anti-GRASP Antibody人抗胃壁抗體(AGPA/PCA)
釀酒酵母水蛭Anti-GPX3 Antibody人抗胃壁抗體(AGPA/PCA)
金黃節(jié)桿菌人類(lèi)狀瘤病16抗原Anti-GRAP Antibody人抗網(wǎng)硬蛋白抗體(ARA)
黑木耳鐵調(diào)節(jié)蛋白25Anti-GRASP Antibody人抗網(wǎng)硬蛋白抗體(ARA)
大腸埃希氏菌(大腸桿菌)4羥基壬烯偶聯(lián)牛血清白蛋白Anti-GRIK2 Antibody人抗網(wǎng)硬蛋白抗體(ARA)
康寧(氏)木霉干擾-γ多肽抗原(人)Anti-GRIA1 Antibody人抗網(wǎng)硬蛋白抗體(ARA)
醛固類(lèi)還原家族7成員A2抗體蘇云金芽孢桿菌猝倒亞種人牙齦上皮細(xì)胞
三磷腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員8抗體蘇云金芽孢桿菌戈?duì)査沟伦兎N小鼠肝枯否細(xì)胞
閱讀障礙相關(guān)蛋白Shootin抗體枯草芽孢桿菌深黑變種小鼠肉瘤瘤株
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SCDO3抗體塵埃芽孢桿菌人角膜上皮細(xì)胞
CK1δ/CK1抑制劑(SR-3029)球毛殼
白粑齒 溴化鋰
埃氏巨球形* 鈦鐵試劑
污水德沃斯氏 四氧化三鐵
圍小叢殼 鉑酸
葡萄座腔屬 紫脲酸
釀酒酵母 硬脂酸
灰樹(shù)花 3-苯酸
雙歧雙歧桿 肉豆蔻酸
Agrococcus terreus 肉豆蔻酸
雜色曲霉 衣康酸
小馬勃2-2 DL-4-羥基-3-甲氧基扁桃酸
味側(cè)耳 高香草酸
長(zhǎng)枝木霉 反式-2-己烯酸
拜耳接合酵母 十七酸