商品介紹:
DC_05是非核苷類DNMT1抑制劑,,IC50值為10.3uM。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:890643-16-0 分子量:383.49 儲存條件:-20℃,,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用,。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:DNMT1抑制劑(DC_05)
英文名稱:DC_05
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核,、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究,;
③細胞骨架體系的研究,;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控,;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2,、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,;
5、PBS沖洗細胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,,細胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3,、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時,,使MTT 還原為甲臜。
6,、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻,。
7,、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8,、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值,。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
小鼠轉化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒 ,英文名: TGFβ2 ELISA Kit
小鼠甲狀腺素抗體(TAb)ELISA檢測試劑盒MouseThyroxineaibody,TAbELISAKit 96T/48T
人抗U1小核核糖核蛋白70kDa(SNP70)抗體免疫試劑盒 Human ai U1 small nuclear ribonucleoprotein 70kDa(SNP70)aibody ELISA kit
RabbitVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAKit兔血管內皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細胞IGF蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20次
Humanβ-siteAPP-CleavingEnzyme1,,1BACE1ELISA試劑盒人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素1β(IL1β)ELISA試劑盒 ,,英文名: IL1β ELISA Kit
人抗促甲狀腺素受體抗體(Ab)ELISA檢測試劑盒humahyroidstimulatinghormonereceptoraidoby,AbELISAKit 96T/48T
大鼠巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)免疫試劑盒 Rat Macrophage-Derived Chemokine,MDC ELISA kit
英文名稱RatGamma-aminobyricacidELISAKit大鼠γ氨基丁酸(GABA)規(guī)格:96T/48T
聚糖對氨基苯甲酸(2-AA)熒光標記試劑盒20次
ELISAKitHSP-90人熱休克蛋白90規(guī)格:48T/96T
豬生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human somal cell derived factor 1 beta (SDF-1 beta /CXCL12) ELISA Kit 人基質細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒
GuineapigleukoieneD4,LT-D4ELISAKit 豚鼠白三烯D4(LTD4)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
CLIAKitforANG-2(RabbitAngiopoietin2)ELISAKit兔血管生成素2規(guī)格:48T/96T
血液多胺氧化酶(PAO)活性比色法定量檢測試劑盒20次
PorcineEpinephrine/Adrenaline,EPIELISAKit豬腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
DNMT1抑制劑(DC_05)SKA2 英文名稱: 紡錘體和著絲粒相關蛋白2抗體 0.2ml
Fascin1 英文名稱: 纖維束1抗體 0.1ml
煙堿型乙酰膽堿受體α4抗體 Anti-N-AChR α4 0.1ml
Anti-SFRP1/FITC 熒光素標記分泌型卷曲相關蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-PAK6(Ser165) 磷酸化P21蛋白激活的蛋白激酶6 規(guī)格 0.1ml
AIF (Apoptosis-Inducing Factor) 調亡誘導因子(多肽片斷抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg