IGF-1R和IR抑制劑(GSK1904529A)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-Phospho-mu Opioid Receptor (Ser375) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化μ-型受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgM/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記兔抗小鼠IgMMulti-class antibodies規(guī)格：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存,。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

對于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）,。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。

對于貼壁細(xì)胞,，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短,，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來,，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后,，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次,。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml,。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中,，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻,，室溫避光孵育15min,。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后,，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）,。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置,。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot）,，F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片,，顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán),。

黑色附球菌Serratia rubidaea

德布爾有孢酵母Shewanella algae

產(chǎn)紅青霉Shewanella aquimarina

中慢生華癸根瘤菌Shewanella loihica

奇異球菌Shewanella fidelis

枯草芽孢桿菌Shewanella haliensis

野油菜黃單胞菌Shewanella loihica

米曲霉Shewanella marinintestina

克魯斯假絲酵母Shewanella pneumatophori

巴氏醋桿菌巴氏亞種Shewanella sairae

寬雄腐霉*Shewanella schlegeliana

大豆慢生根瘤菌Shewanella schlegeliana

酵母菌y2hgoldShewanella schlegeliana

香菇Shigella boydii

雞白痢沙門氏菌Silvimonas amylolytica

中華根霉Shigella flexneri

小鼠維生B6(VB6)免疫試劑盒光激A相互作用蛋白1抗體人黑色瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)葫蘆D

小鼠維生B12(VB12)免疫試劑盒載脂蛋白樣蛋白6抗體人黑色瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)葫蘆E

小鼠維生A(VA)免疫試劑盒凋亡相關(guān)蛋白TGFb信號抗體人癌易感蛋白2(BRCA-2)槲皮苷

小鼠微管相關(guān)蛋白1A/1B輕鏈3B(MAP1LC3B)免疫試劑盒A2LD1蛋白抗體人癌易感蛋白2(BRCA-2)槲皮
IGF-1R和IR抑制劑(GSK1904529A)SSX8 英文名稱： 滑膜肉瘤X斷點(diǎn)蛋白8抗體 0.1ml

Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser118) 英文名稱： 磷酸化雌激素受體α抗體 0.1ml

三碘甲狀腺素T3抗體 Anti-T3 0.2ml

Anti-TIMP-4/FITC 熒光素標(biāo)記金屬蛋白酶組織抑制因子-4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-LRP5(Thr1492) 磷酸化低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5抗體 規(guī)格 0.1ml

NOS-2 (iNOS) Nitric Oxide Synthase,Inducible 一氧化氮合成酶-2(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg