產(chǎn)品屬性:
中文名稱:JAK3抑制劑(JANEX-1)
英文名稱:JANEX-1
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
JANEX-1是一種有效的特異性JAK3抑制劑,,Ki為2.3μM,IC50為78μM,,JANEX-1不抑制JAK1和JAK2。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:202475-60-3 別名:WHI-P131 純度:99.64% 分子量:297.31 儲存條件:-20℃,,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用,。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究,;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
松口蘑人雌激Anti-UBFD1 Antibody人高速泳動蛋白17(HMG-17)
島青霉人褪黑Anti-UBQLN4 Antibody人空泡相關(guān)蛋白A(VacA)
宛氏擬青霉人6前列腺Anti-UBTD1 Antibody人空泡相關(guān)蛋白A(VacA)
潘諾尼亞鎖霉人血栓B2Anti-UBR1 Antibody人玻連蛋白/體外粘連蛋白(VN/CD51+CD61)
卵形巴貝斯蟲(盧氏株)人皮質(zhì)/腎上腺Anti-UBTD1 Antibody人玻連蛋白/體外粘連蛋白(VN/CD51+CD61)
枯草芽孢桿菌人前列腺E2Anti-UBTF Antibody人波形蛋白(VIM)
產(chǎn)腸大腸埃希氏菌人雙氫睪Anti-UBXN11 Antibody人波形蛋白(VIM)
金黃色葡萄球菌人促生長激釋放激Anti-UBTD2 Antibody人表面活性蛋白D(SP-D)
產(chǎn)氣莢膜梭菌 A型人孕激/孕Anti-UCHL1 Antibody人表面活性蛋白D(SP-D)
葛氏沙雷氏菌人超敏游離雌三Anti-UCP3 Antibody人阿伯半乳糖蛋白(AGPs)
熒光威克酵母人去甲腎上腺Anti-UCN Antibody人阿伯半乳糖蛋白(AGPs)
層出鐮孢菌人前列腺FAnti-UCP3 Antibody人β乳球蛋白(β-Lg)
宇佐曲霉人前列腺EAnti-UGDH Antibody人β乳球蛋白(β-Lg)
蘋果殼囊孢人內(nèi)皮1Anti-UGGT1 Antibody人β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)
栗疫菌人促卵泡Anti-UPK3A Antibody人β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)
霍亂弧菌人游離β絨毛膜促性腺激Anti-ULK2 Antibody人淀粉樣前體蛋白(βAPP)
FUT3抗體燕麥鐮刀菌S-66-5
泛激活E1抗體肉色杯傘SCRV-G-1B2
泛特異性蛋白9X抗體白鱗蘑菇G2C51A2
去泛10抗體蘋果生鏈格孢抗人fusion單抗7
JAK3抑制劑(JANEX-1)Paraburkholderia sp. 1,3-二甲基酸
褐球固氮 木栓酮
費(fèi)氏酸桿 1,4-哌二乙磺酸單鈉
釀酒酵母 麻醉椒苫
乳酒假絲酵母 羥基茜草
產(chǎn)色鏈霉 茅蒼術(shù)
累西菲鏈霉 麗春紅2R
根瘤 牡荊油
珞珈山科恩氏 對二甲氨基亞芐基羅丹寧
球形孢囊 馬兜鈴酸C
枯草芽孢桿 麝香草
核盤 釕紅
海南德克斯酵母 1,3-茚二酮
近綠曲霉 N-(4-氨基丁基)-N-乙基異魯米諾
嗜熱乳酸鏈球,;嗜熱鏈球 沒食子酸辛酯
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3,、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間,。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜,。
6,、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻,。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)