詳細介紹
商品介紹:
OSI-420是erlotinib的活性代謝物,,erlotinib為表皮生長因子受體酪氨酸激酶(EGFR tyrosin kinase)抑制劑,。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:183320-51-6 別名:Desmethyl Erlotinib;CP-473420 純度:98.90% 分子量:415.87 儲存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用,。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
OSI-420 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水),。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞,。
對于貼壁細胞,,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,,轉移到離心管內,,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,,離心收集細胞,,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,,重懸細胞,,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,,輕輕混勻,室溫避光孵育15min,。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測),。
建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置,。結果可用CellQuest等軟件進行分析,,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,,PI為縱坐標,。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,,顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細胞膜完整性的細胞,,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán),。
公司產品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),,90%;優(yōu)質胎牛血清,,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲存,。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
紅細菌PE-Cy3標記的兔抗親和Anti-RPSA Antibody肌侵蛋白(MTPN)
金灰青霉PE-Cy7標記的小鼠抗牛IgGAnti-RPS6KA3 Antibody肌切蛋白(SCIN)
Pontibaca辣根過氧化物標記的兔抗牛IgMAnti-RRBP1 Antibody肌鈀蛋白(MYPN)
光帽鱗傘辣根過氧化物標記的兔抗牛IgGAnti-RPS6KA5 Antibody肌聯(lián)蛋白(TTN)
釀酒酵母辣根過氧化物標記的羊抗牛IgGAnti-RPSA Antibody肌漿球蛋白(Myo)
短密青霉辣根過氧化物標記的兔抗生物抗體IgGAnti-RRM2 Antibody(PB0863)肌腱蛋白X(TNX)
香草蘭根疾FITC標記的兔抗牛IgMAnti-RRM2B Antibody肌腱蛋白R(TNR)
白黃側耳FITC標記的兔抗牛IgGAnti-R1 Antibody肌腱蛋白N(TNN)
青霉屬羅丹明標記的兔抗牛IgMAnti-RTL10 Antibody肌腱蛋白M4(TENM4)
忽視擬盤多毛孢PE標記的羊抗牛IgGAnti-RTN3 Antibody肌腱蛋白M3(TENM3)
紅色紅曲霉PE標記的兔抗牛IgMAnti-RUNX1 Antibody(PB0170)肌腱蛋白M2(TENM2)
許旺酵母Alexa Fluor 647標記的兔抗牛IgGAnti-RUNX1T1 Antibody肌腱蛋白M(TNM)
綠針假單胞菌PE-Cy5.5標記的兔抗牛IgGAnti-RUNX3 Antibody肌腱蛋白C(TNC)
副豬嗜血桿菌(可訂購)PE-Cy5.5標記的兔抗牛IgMAnti-RUNX2 Antibody肌間蛋白3(MYOM3)
Rosetta(DE3)pLysSPE-Cy7標記的兔抗牛IgMAnti-RXFP2 Antibody肌間蛋白2(MYOM2)
紅球菌Cy3標記的羊抗牛IgGAnti-RUNX3 Antibody(PB0429)肌間蛋白1(MYOM1)
NIFK蛋白抗體魚乳桿菌小鼠內臟脂肪細胞提取物
核轉錄因子X盒結合蛋白1抗體威海海洋噬瓊膠菌大鼠小腸粘膜上皮細胞提取物
泛結合E2F抗體諾卡氏菌屬大鼠食管上皮細胞提取物
NOGO相互作用線粒體蛋白1抗體畢赤酵母屬大鼠結腸平滑肌細胞提取物
EGFR tyrosin kinase抑制劑(OSI-420)貝倫格勒座腔梨?;?/span> 二氫柯楠因
平菇 柯楠因
變色栓(云芝) 2-苯乙酰
糙皮側耳 異性南五味子乙; 異南五味子 B
枯草芽孢桿 環(huán)氧五味子
香蕉 間氨基
阿維鏈霉 槐苦參,槐
釀酒酵母 三(2,4-二叔丁基)亞磷酸苯酯
一色齒毛 12,13-去氫苦參堿
擬無枝酸 茯苓新酸A
枯草芽孢桿 硝酸硫
黃色鐮刀* 去氫土莫酸
炭疽芽孢桿 無水化錳
鮑氏不動桿 過氧去氫土莫酸
無 4-沒食子?;鼘幩?/span>