產(chǎn)品屬性:
中文名稱:鈣蛋白酶抑制劑(PD 151746)
英文名稱:PD 151746
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
PD151746是鈣蛋白酶抑制劑,抑制u-calpain(Ki=0.26±0.03μM)選擇性比抑制m-calpain(Ki=5.33±0.77μM)高20倍,。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:179461-52-0 分子量:237.25 儲存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核,、染色體以及基因表達的研究,;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究,;
④細胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細胞的起源與進化,;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;
2、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5,、PBS沖洗細胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
磺加貝酯(標準品)英文名稱: Glimepiride鈣粘附蛋白8抗體包裝1g
磺羅(標準品)英文名稱: Griseofulvin;Fulcin6號染色體開放閱讀框174抗體包裝5g
磺帕珠沙星(標準品)英文名稱: Griseofulvin6號染色體開放閱讀框150抗體包裝25g
磺培沙星(標準品)英文名稱: Sodium hyaluronateX染色體開放閱讀框56抗體包裝5g
磺齊拉西(標準品)英文名稱: Hydrocortisone9號染色體開放閱讀框152抗體包裝25g
磺伊馬替尼(標準品)英文名稱: Hydrocortisone6號染色體開放閱讀框58抗體包裝5g
基斑蝥(標準品)英文名稱: Ibutilide fumarate 接觸蛋白相關(guān)蛋白4抗體包裝1g
基丁香酚(標準品)英文名稱: Ibutilide fumarate CD24抗體包裝1g
基原薯蕷皂苷(標準品)英文名稱: Isepamicine Sulphate接觸蛋白相關(guān)蛋白3抗體包裝100g
硫二馬尼(標準品)英文名稱: BexaroteneCD24抗體包裝25g
硫新斯的明(標準品)英文名稱: Bexarotene限局性核因子3抗體包裝1g
巰咪唑(標準品)英文名稱: Ketoprofen胰羧肽A6抗體包裝250mg
巰咪唑(標準品)英文名稱: Ketoprofen9號染色體開放閱讀框150抗體包裝5g
硝唑(標準品)英文名稱: Ketotifen fumarate鈣粘附蛋白9抗體包裝1g
硝唑雜質(zhì)A(2-基-5-硝基咪唑)標準品英文名稱: Ketotifen fumarate鈣粘蛋白15抗體包裝5g
: =AS3.951資源名稱: 米曲霉 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP腺苷環(huán)化1試劑盒五味子乙;Schisandrin B
: 75-049資源名稱: 非O1群霍亂弧菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體G2試劑盒土克甾;Turkesterone
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP32腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體A1試劑盒土貝母皂苷乙;TubeiMoside I
鈣蛋白酶抑制劑(PD 151746)硝唑偶聯(lián)血藍蛋白穿山龍(標準品)Human
三聚與雞卵白蛋白偶聯(lián)物穿心蓮(標準品)Human, Mouse
神經(jīng)元特異性烯化抗原穿心蓮內(nèi)酯(標準品)Human, Mouse, Rat
Nogo-66 (1-40)船形烏頭(標準品)Human
神經(jīng)肽 Y(1-36)垂盆草(標準品)Human, Mouse, Rat
神經(jīng)保護肽椿皮(標準品)Human
神經(jīng)絲蛋白蛋白多肽慈溪麥冬皂苷AHuman
土霉偶聯(lián)牛血清白蛋白次野鳶尾黃(標準品)Human, Mouse
土霉偶聯(lián)雞卵白蛋白甘草查爾(標準品)Human, Mouse
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,,需根據(jù)細胞的大小,,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細胞),,各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細胞的OD 值,,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)