商品介紹:
Monastrol是具有高效性和細(xì)胞滲透性的有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白Eg5的抑制劑,,IC50值為14μM. 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):329689-23-8 別名:(±)-Monastro 純度:99.89% 分子量:292.35 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白Eg5抑制劑(Monastrol)
英文名稱:Monastrol
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
南擬酵母Bacillus thuringiensis巨噬移動(dòng)抑制因子(MIF)
產(chǎn)黃青霉Bacillus thuringiensis駱駝β內(nèi)啡肽(β-EP)
瓶孢野野村氏菌Bacillus thuringiensis駱駝β內(nèi)啡肽(β-EP)
賴芽胞桿菌屬Bacillus thuringiensis駱駝脂蛋白磷脂A2(Lp-PL-A2)
釀酒酵母橢圓變種Bacillus thuringiensis駱駝脂蛋白磷脂A2(Lp-PL-A2)
Winogradskyella eximiaBacillus thuringiensis駱駝內(nèi)皮1(ET-1)
藍(lán)微褐鏈霉菌Bacillus thuringiensis駱駝內(nèi)皮1(ET-1)
松柏假單胞菌閃光亞種Bacillus thuringiensis駱駝轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)
香菇Bacillus thuringiensis駱駝轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)
墻壁圣格奧爾根菌Bacillus thuringiensis馬生長(zhǎng)激(GH)
乳球菌屬Bacillus thuringiensis馬生長(zhǎng)激(GH)
燕麥鐮孢Bacillus thuringiensis馬主要組織相容性復(fù)合體(MHC/ELA)
蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種Bacillus thuringiensis馬主要組織相容性復(fù)合體(MHC/ELA)
球團(tuán)灰色鏈霉菌Bacillus thuringiensis馬免疫球蛋白E(IgE)
釀膿鏈球菌Bacillus thuringiensis馬免疫球蛋白E(IgE)
枯草芽孢桿菌Bacillus thuringiensis馬β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)
核基質(zhì)結(jié)合區(qū)結(jié)合蛋白1抗體戈?duì)柕伦鶜ゆ吒穹扑雇郀柕骆?zhèn)磁螺菌
細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體鉛色青霉魯氏少根根霉
Sema6A抗體華麗曲霉產(chǎn)黑普雷沃氏菌
S100A9抗體灰綠曲霉中華石花菌
有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白Eg5抑制劑(Monastrol)Phospho-Stathmin(Ser25) 英文名稱: 磷酸化原癌基因蛋白18 0.1ml
EPS8 英文名稱: 表皮生長(zhǎng)因子受體底物8抗體 0.1ml
滑膜細(xì)胞凋亡抑制物1抗體 Anti-SYVN1 hu,、 rat、 mo,、 cattle 0.2ml
Anti-TIMP-2/FITC 熒光素標(biāo)記金屬蛋白酶組織抑制因子-2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-LRP6(Thr1479) 磷酸化低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6抗體 規(guī)格 0.1ml
Bak(BCL2 homologous antagonist/killer) Bcl-2同源拮抗劑Bak(多肽)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2mg