商品介紹:
ZM323881hydrochloride是有效,選擇性的VEGFR2抑制劑,IC50值小于2nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):193000-39-4 純度:99.53% 分子量:411.86 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:VEGFR2抑制劑(ZM323881 hydrochloride)
英文名稱:ZM323881 hydrochloride
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無(wú)菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無(wú)細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
西藏假絲酵母Escherichia coli大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)
平滑假絲酵母Escherichia coli大鼠色P4502E1(CYP2E1)
釀酒酵母Escherichia coli大鼠色P4502E1(CYP2E1)
靈芝Escherichia coli大鼠α1微球蛋白(α1-MG)
植物乳桿菌Escherichia coli大鼠α1微球蛋白(α1-MG)
葉點(diǎn)霉屬Escherichia coli大鼠單核趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)
葡萄座腔菌Escherichia coli大鼠單核趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)
枯草芽孢桿菌Escherichia coli大鼠過(guò)氧化物體增殖物激活受體α(PPAR-α)
LaceyellaEscherichia coli大鼠過(guò)氧化物體增殖物激活受體α(PPAR-α)
矩圓黑盤孢Escherichia coli大鼠鈣調(diào)(CAM)
米曲霉Escherichia coli大鼠鈣調(diào)(CAM)
假單孢菌Escherichia coli大鼠載脂蛋白E(Apo-E)
燕麥?zhǔn)染鞴蟻喎N*Escherichia coli大鼠載脂蛋白E(Apo-E)
假單胞菌屬Escherichia coli大鼠網(wǎng)膜(omentin)
蘇云金芽孢桿菌庫(kù)爾斯塔克亞種Escherichia coli大鼠網(wǎng)膜(omentin)
葡萄座腔菌Escherichia coli大鼠孤腓肽(OFQ/N)
蛋白質(zhì)磷2B抗體PP2AβPP2A-β暗色擬莖點(diǎn)霉人淋巴母細(xì)胞(EBV轉(zhuǎn)化)
cGMP依賴性蛋白激1抗體葉下珠生擬莖點(diǎn)霉EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞(祜族)
胞粘蛋白1抗體抗體菜豆間座殼EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞(彝族)
過(guò)氧化物體增殖物激活受體γ輔激活子1α+β抗體毛豆炭疽病菌人胚肺轉(zhuǎn)化細(xì)胞
VEGFR2抑制劑(ZM323881 hydrochloride)廣島鏈霉 十六烷基基
枯草芽孢桿 熬和樹(shù)脂
枯草芽孢桿 聚酰-6-薄膜
鼠傷寒沙門氏 聚酰-6-薄膜
平臍蠕孢 乙酸纖維薄膜
希瓦氏 乙酸纖維薄膜
釀酒酵母 產(chǎn)芽孢肉湯
新月彎孢 羥基纖維
哈茨木霉 D-環(huán)絲
Hydrogenophaga 聚蔗糖400
肺炎克雷伯氏 葡聚糖T2000
矮棒曲霉 胰月示-亞硫酸鹽-環(huán)絲瓊脂基礎(chǔ)(TSC)
密旋鏈霉 葡聚糖T1000
淺棕褐小單孢 酪蛋白瓊脂
彎孢 胰酪胨大豆羊血瓊脂基礎(chǔ)