產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Pim1/AKK1/MST2/LKB1抑制劑
英文名稱:Pim1/AKK1-IN-1
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
Pim1/AKK1-IN-1是一種有效的多種酶抑制劑,能夠作用于Pim1/AKK1/MST2/LKB1,,Kd值分別為35nM/53nM/75nM/380nM,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:1093222-27-5 別名:LKB1/AAK1 dual inhibitor 純度:98.10% 分子量:339.35 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
啤酒神金黃桿菌基質(zhì)金屬蛋白2抗體Human MCUR1 ELISA Kit硫皮膚(DS)
卷枝毛霉灰藍(lán)變型基質(zhì)金屬蛋白3抗體Human SLIT2(Slit homolog 2 protein) ELISA Kit硫腦苷酯(SFT)
微枝形桿菌基質(zhì)金屬蛋白-7抗體Human MCCC1 ELISA Kit硫類肝(HS/HPS)
糙梗青霉基質(zhì)金屬蛋白-9抗體Human MDC1 ELISA Kit硫類肝(HS)
淺白隱球酵母髓鞘少樹突膠質(zhì)糖蛋白抗體Human MCCC2 ELISA Kit硫角質(zhì)(KS)
釀酒酵母多藥耐藥相關(guān)蛋白1抗體Human BID(BH3-interacting domain death agonist) ELISA Kit硫雌(E1S)
白藍(lán)放線菌多藥耐藥相關(guān)蛋白2抗體Human PGA3(Pepsin A) ELISA Kit硫嘌呤S-甲基轉(zhuǎn)換(TPMT)
根瘤菌多藥耐藥相關(guān)蛋白3抗體Human Smad7/MADH7(Mothers Against Decapentaplegic Homolog 7) ELISA Kit硫化氫(H2S)
堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌線粒體核糖體蛋白L28抗體Human TNFAIP6(Tumor necrosis factor-inducible gene 6 protein) ELISA Kit鱗狀癌相關(guān)抗原(SCCAg)
Mucilaginibacter sp.錯(cuò)配修復(fù)蛋白2抗體Human ABP1(Amiloride-sensitive amine oxidase [copper-containing]) ELISA Kit鱗狀癌抗原1(SCCAg1)
大腸埃希菌5甲基胞嘧啶抗體Human MAOA(Amine oxidase [flavin-containing] A) ELISA Kit鱗狀上皮癌抗原2(SCCAg-2)
米曲霉T淋巴分化蛋白MAL2抗體Human GCK(Glucokinase) ELISA Kit磷酯酰肌特異性磷酯C(PIPLC)
普通變形菌環(huán)指蛋白61抗體Human CTXI(Cross Linked C-opeptide of Type I Collagen) ELISA Kit磷酯Cγ鏈(PLCγ1)
異配囊接霉蕈堿型乙酰受體M3抗體Human ITGA2B(Integrin alpha-IIb) ELISA Kit磷酯C(PLC)
香菇錯(cuò)配修復(fù)蛋白1抗體Human ANGPT4(Angiopoietin-4) ELISA Kit磷脂轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(PLTP)
頭孢霉血管緊張Ⅱ2型受體相互作用蛋白抗體Human ITGA2B(Integrin alpha-IIb) ELISA Kit磷脂轉(zhuǎn)移蛋白β(PITPNB)
芽孢桿菌屬Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:粘度11250-21000mPas
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:粘度55 - 60 mPa.s辛弗林
漏斗狀側(cè)耳(鳳尾菇)Dictyophora│sajor-caju 質(zhì)量規(guī)格:30000 mpa.s,BR熊果苷
Pim1/AKK1/MST2/LKB1抑制劑淺絳紅鏈霉 4--3,5-二硝基三氟甲苯CD4分子Elisa
節(jié)桿屬 2-氟-3-吡啶羧酸CD8分子Elisa
釀酒酵母 鄰氟苯甲酰神經(jīng)營養(yǎng)因子3Elisa
平菇 4-硝基-3-三氟乙酰轉(zhuǎn)移Elisa
釀酒酵母 2-溴三氟甲苯γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽Elisa
放射形根瘤 2-氨基-5-苯甲脫氧吡啶酚;脫氧吡啶啉Elisa
炭疽芽孢桿 (-)-10-樟腦磺酰5α還原Elisa
玉米黑粉 異煙酰鹽酸鹽狂犬病糖蛋白Elisa
大腸埃希氏 4-氟吡啶鹽酸鹽狂犬核蛋白Elisa
浸麻類芽孢桿 2-叔丁酯尿蛋白Elisa
泡盛曲霉 反-2-癸烯蛋白激AElisa
畢赤酵母 2-噻吩乙酰半乳糖凝集3Elisa
枯草芽孢桿 2-酸賴氨酰氧化樣蛋白2Elisa
李色鏈霉 甲氧基乙酰幾丁質(zhì)Elisa
根瘤屬 5-氟-8-羥基喹啉凝血因子XIIaElisa
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻,。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)