產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):FabI抑制劑(AFN-1252)
英文名稱(chēng):AFN-1252
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
AFN-1252(Debio1452)是FabI高效抑制劑,能抑制金黃色葡萄球菌,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號(hào):620175-39-5 別名:API-1252;Debio 1452 純度:98.07% 分子量:375.42 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用,。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究,;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無(wú)菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
白花前胡A英文名稱(chēng): 2-Naphthol白介1受體9抗體包裝5g
白花前胡(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 1-Nitroso-2-NaphtholRasGTP激活蛋白IQGAP3抗體包裝5g
白花前胡乙(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Sulfochlorophenol S sodium calcium saltIroquois同源蛋白1抗體包裝100g
白花蛇舌草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 1-Naphthol跨膜蛋白BRI抗體包裝25g
白樺脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Guaiacol跨膜蛋白ITM2C抗體包裝10g
白樺脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): NaphtholAS白介31抗體包裝1g
白樺脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Anthrone人血清型免疫球蛋白A抗體包裝25g
白及(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Thiomichler's ketoneIrx3蛋白抗體包裝5g
白蠟樹(shù)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Ninhydrin 頂端體蛋白10抗體包裝1g
白蘞(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Phenidone人分泌型免疫球蛋白A包裝250mg
白麻苷英文名稱(chēng): ARA-AMP;Vidarabine monophosphate胰島自身抗原1抗體包裝1g
白茅根(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): α-Naphthoflavone胰島基因增強(qiáng)結(jié)合蛋白2抗體包裝25g
白皮杉,3'-羥基白藜蘆;比杉特(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Murexide白介-16抗體包裝5g
白皮杉-3'-O-葡萄糖苷英文名稱(chēng): Hydroxylammonium chloride離子鈣接頭蛋白抗體包裝25ml
白前(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 3,3'-DimethylnaphthidineIroquois同源蛋白4抗體包裝250mg
: FERMBP3825資源名稱(chēng): 惡臭假單胞菌 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP,Aromatase inhibitor類(lèi)風(fēng)濕因子試劑盒胡桃醌;
蜜蜂生球擬酵母Torulopsis│apicola 質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品類(lèi)風(fēng)濕因子試劑盒灰氈毛忍冬皂苷;Macranthoid
諾卡氏菌屬菌種Nocardia│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,AR類(lèi)風(fēng)濕因子試劑盒海藻糖;Trehalose
FabI抑制劑(AFN-1252)熒光PE標(biāo)記豬胰島蛋白番茄(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
熒光PE標(biāo)記血藍(lán)蛋白番石榴苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
熒光PE標(biāo)記人血白蛋白番石榴葉(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
熒光PE標(biāo)記胰糜蛋白番瀉苷A(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
熒光APC標(biāo)記小鼠IgG(流式同型對(duì)照)番瀉苷B(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
熒光APC標(biāo)記大鼠IgG(流式同型對(duì)照)番瀉苷C(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
熒光APC標(biāo)記牛IgG番瀉苷D(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
熒光APC標(biāo)記牛IgM番瀉葉(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
熒光APC標(biāo)記雞IgG翻白草(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3,、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜,。
6,、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻,。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)