ATR抑制劑(AZ20)公司正在出售的產(chǎn)品：Raptor /FITC 熒光標(biāo)記mTOR相關(guān)調(diào)控蛋白抗體IgG
Rad17/FITC 熒光標(biāo)記周期檢控Rad17蛋白抗體IgG
Phospho-Rad17 (Ser645) /FITC 熒光標(biāo)記化周期檢控Rad17蛋白抗體IgG
Rad51/FITC 熒光標(biāo)記Rad51抗體IgG
Rad52/FITC 熒光標(biāo)記Rad52抗體IgG
RAD51

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO),，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳,，5%,。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3）凍存液：90%血清,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,，液氮儲存,。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM,，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）,。

2) 對于懸浮細(xì)胞,，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞,，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,，加入細(xì)胞培養(yǎng)液,，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),，500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,，離心收集細(xì)胞,，共洗滌兩次,。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml,。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中,，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻,，室溫避光孵育15min,。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）,。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置,。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot）,，F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片,，顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,，細(xì)胞核顯示紅色,，膜上有綠色光環(huán)。

柔嫩艾耳球蟲Escherichia coli大鼠白介1受體拮抗劑(IL1Ra)

薔薇枝枯病Escherichia coli大鼠白介1受體拮抗劑(IL1Ra)

根瘤菌Escherichia coli大鼠白介1受體拮抗劑(IL1Ra)

微小合軸酵母Escherichia coli大鼠胰島自身抗體(IAA)

皮奧亞類芽孢桿菌Escherichia coli大鼠胰島自身抗體(IAA)

多主葡萄座腔菌Escherichia coli大鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)

食用色堿性橙Ⅱ(王金黃)對照液Escherichia coli大鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)

可可里亞鎮(zhèn)鏈孢菌Escherichia coli大鼠可溶性Toll樣受體6(sTLR6)

果生鏈核盤菌Escherichia coli大鼠可溶性Toll樣受體6(sTLR6)

淺黃色芽胞八疊球菌Escherichia coli大鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)

半裸法氏殼Escherichia coli大鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)

腐皮鐮孢菌Escherichia coli大鼠前列腺F2α(PGF2α)

魯氏接合酵母Escherichia coli大鼠前列腺F2α(PGF2α)

桃樹葉細(xì)菌性穿孔病*Escherichia coli大鼠白三烯E4(LTE4)

普通變形桿菌Escherichia coli大鼠白三烯E4(LTE4)

多粘類芽孢桿菌Escherichia coli大鼠尿激(UK)

磷脂磷水解1抗體多帶革孔菌果子貍肺成纖維樣細(xì)胞

抑癌基因p16/p14/P19抗體中國擬迷孔菌大額牛皮膚細(xì)胞

過氧化還原5/6抗體木蹄層孔菌黃牛皮膚細(xì)胞

過氧化還原1抗體大孢薄孔菌牦牛皮膚細(xì)胞
ATR抑制劑(AZ20)乳酸芽孢桿 偶氮脒類引發(fā)劑V50

麥根腐平臍蠕孢 偶氮脒類引發(fā)劑V30

雙歧雙歧桿 辛辣內(nèi)酯A

曲霉屬 蒼耳亭

豬丹絲 虎掌草皂甙D

德爾布有孢酵母 鈀碳加氫催化劑

橙鱗傘 多被銀蓮花皂苷R8

鏈霉 1,，3-二甲基脲

枯草芽孢桿 噻二酮苷

被孢霉屬 布魯諾廣譜高效劑

酮丁梭 噻二酮

產(chǎn)馬乳酒乳桿產(chǎn)馬乳酒亞種 液體生物防腐劑

解聚糖類芽孢桿 硫酸小檗堿

灰葡萄孢* 十烷基基

魯氏接合酵母 二氫小檗堿