產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):4-羥基脯氨酸抑制劑(Malotilate)
英文名稱(chēng):Malotilate
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
Malotilate可作用于肝細(xì)胞,,促進(jìn)其RNA合成,激活核糖體,,提高蛋白質(zhì)合成能力,從而激活肝功能并抑制肝纖維化,,還能抑制肝內(nèi)4-羥基脯氨酸量的增加,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號(hào):59937-28-9 別名:NKK 105 分子量:288.38 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無(wú)菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體Ⅰ(TGFβR1)ELISA試劑盒 ,,英文名: TGFβR1 ELISA Kit
犬骨橋素(OPN)ELISA檢測(cè)試劑盒CanineOsteopoin,OPNELISAKit 96T/48T
犬K1(VK1)免疫試劑盒 Canine Vitamin K1,VK1 ELISA Kit
英文名稱(chēng)HumanansformingGrowthfactorβ1ELISAkit人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGFβ1)規(guī)格:96T/48T
超氧化物歧化酶(SOD)紅細(xì)胞裂解樣品制備試劑盒50次
RatGonadoopin-releasinghormonereceptor,GHRELISA試劑盒大鼠促性腺激素釋放激素受體(GHR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Explicit peptide (extein) ELISA Kit 人外顯肽(extein)ELISA試劑盒
HumanskeletalmuscleActinin-α,smActinin-αELISAKit 人橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α(smActinin-α)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
HumanCardiacmyosin-lightchains1,CMLC-1ELISA試劑盒人心肌肌凝蛋白輕鏈1(CMLC-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
煮沸法質(zhì)粒/柯斯質(zhì)粒DNA快速抽提試劑盒20次
humansolubleclusterofdiffereiation28,sCD28ELISAKit人可溶性CD28(sCD28)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豬瘦素(LEP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human maix Gla protein (MAT) ELISA Kit 人基質(zhì)裂解蛋白(MAT)ELISA試劑盒
guineapigniicoxide,NOELISAKit 豚鼠血清一氧化氮(NO)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
CLIAKitforANG-4(HumanAngiopoietin4)ELISAKit人血管生成素4規(guī)格:48T/96T
血液丁酰膽堿酯酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒20次
PorcineEsadiol,E2ELISAKit豬雌二醇(E2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
4-羥基脯氨酸抑制劑(Malotilate)ANUP 英文名稱(chēng): 抗蛋白ANUP抗體 0.2ml
EEF2 英文名稱(chēng): 真核翻譯延長(zhǎng)因子2抗體 0.2ml
核小體組裝蛋白1抗體 Anti-NAP1 1ml
Anti-Phospho-SGK1 (Ser78)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-PAK2(Ser141) 磷酸化p21激活激酶2抗體 規(guī)格 0.1ml
2,4-D/BSA 2,4-二氯苯氧乙酸偶聯(lián)血清白蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 5mg
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3,、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜,。
6,、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻,。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)