G9a/GLP抑制劑(A-366)公司*的產品：Human matrilysin,MAT ELISA Kit 人質裂解蛋白/質溶木糖 99%
Human triple-helical peptide,THP ELISA Kit 人螺旋肽D-木糖 98%
Human human lysosomal-associated membrane protein 2,HLAMP-2 ELISA Ki

產品屬性：

中文名稱：G9a/GLP抑制劑(A-366)

英文名稱：A-366

產品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產品僅用于科研

商品介紹：

細胞生物學研究有以下幾個方面：

細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：

①細胞核,、染色體以及基因表達的研究；

②生物膜與細胞器的研究,；

③細胞骨架體系的研究,；

④細胞增殖及其調控；

⑤細胞分化及其調控,；

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡),；

⑦細胞的起源與進化；

⑧細胞工程.

實驗報告：

一,、分離與培養(yǎng)：

1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，最后將1mm3左右大?。?/span>

2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；

3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；

二、免疫熒光鑒定：

1,、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,；

2,、PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；

3、PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min,；

4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,；

5,、PBS沖洗細胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；

6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

枯草芽孢桿菌絲/蘇蛋白激TNN13K抗體Anti-HAVCR1 Antibody無脈絡膜蛋白(CHM)

根瘤菌環(huán)指蛋白16抗體Anti-HAVCR1 Antibody無翅型MMTV整合位點家族成員9B(WNT9B)

游動球菌胸腺五肽抗體Anti-HAVCR1 Antibody無翅型MMTV整合位點家族成員7B(WNT7B)

大腸埃希菌白介1受體銜接蛋白抗體Anti-HBA1; Antibody無翅型MMTV整合位點家族成員7A(WNT7A)

芽孢桿菌屬磷化白介1受體銜接蛋白抗體Anti-HAVCR2 Antibody無翅型MMTV整合位點家族成員5B(WNT5B)

平田頭菇腫瘤壞死因子α誘導蛋白3相互作用蛋白2抗體Anti-HCN1 Antibody無翅型MMTV整合位點家族成員5A(WNT5A)

微綠蠟質菌癌抗雌激抵抗蛋白2抗體Anti-HBD Antibody無翅型MMTV整合位點家族成員4(WNT4)

枯草芽孢桿菌枯草亞種凝血調節(jié)蛋白/血栓調節(jié)抗體Anti-HCN2 Antibody無翅型MMTV整合位點家族成員3A(WNT3A)

釀酒酵母腫瘤壞死因子受體相關蛋白3抗體Anti-HCVAg Antibody無翅型MMTV整合位點家族成員3(WNT3)

PL12（平菇）腫瘤壞死因子受體相關因子6抗體Anti-HDAC10 Antibody無翅型MMTV整合位點家族成員2(WNT2)

水生黃桿菌神經干抑制相關蛋白TRIM32抗體Anti-HDAC11 Antibody(PB0674)無翅型MMTV整合位點家族成員11(WNT11)

運動節(jié)桿菌抗體Anti-HDAC3 Antibody無翅型MMTV整合位點家族成員10B(WNT10B)

抗生鏈霉菌速激肽受體3抗體Anti-HDAC2 Antibody無翅型MMTV整合位點家族成員10A(WNT10A)

紅細菌屬凋亡相關蛋白5抗體Anti-HDAC3 Antibody無翅型MMTV整合位點家族成員1(WNT1)

腐皮鐮刀菌微管蛋白γ/Tubulin γ抗體Anti-HDAC4 Antibody無孢蛋白(ASPN)

嗜乳桿菌血管生成受體1抗體Anti-HDAC5 Antibody蝸管蛋白(COIL)

肌漿網(wǎng)鈣ATP1/內質網(wǎng)鈣ATP1抗體解脂亞羅酵母人輸尿管上皮細胞

SPNS1抗體溜曲霉人腎管狀上皮細胞

電壓門控鈉通道SCN3B蛋白抗體分枝犁頭霉人胎盤羊膜細胞

結合珠蛋白家族3A1抗體紅曲霉屬人胚胎滋養(yǎng)層細胞
G9a/GLP抑制劑(A-366)釀酒酵母 5--8-羥基-7-喹啉磷酸化酪氨酸激Elisa

山夫頓堡沙門氏 鈦/Ti酮酸氧化Elisa

匍匐曲霉原變種 碲/Te胰島受體αElisa

大杯香菇 鉭/Ta囊尾蚴抗體Elisa

解脂假絲酵母 鍶/Sr高致病性藍耳病抗體Elisa

解淀粉芽孢桿 錫/Sn超氧化物歧化Elisa

Rathayibacter caricis 硅酸根/SiO32-脂質運載蛋白-2Elisa

棒黃曲霉 二氧化硅/SiO2過氧化6Elisa

靈芝 硅/SiN-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷Elisa

雞腿菇cc968 硒/Se總蛋白Elisa

越桔假絲酵母 鈧/ScS100鈣結合蛋白A9Elisa

黑曲霉 銻/Sb可溶性EndoglinElisa

釀酒酵母 1-(4-基苯基)-3-甲基-5-吡唑酮(4CMP)可溶性血管內皮生長因子受體1Elisa

匍匐曲霉原變種 銻/SbElisa

靈芝屬 5--8-羥基喹啉還原Elisa 

操作規(guī)程

1,、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目,，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）,。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2,、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3,、將96孔板在37℃,，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,，在37℃孵育4小時,，使MTT 還原為甲臜。

6,、吸出上清液,，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻,。

7,、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片,，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT,，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞）,，各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,，T 為加藥細胞的OD 值,，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)