TNF-α分泌抑制劑公司正在出售的產(chǎn)品：Casp4(Human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase) ELISA Kit 人凋亡相關(guān)半胱氨肽4醋鈰 99.9% metals basis
PDXK(Human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase) ELISA Kit 人吡哆/吡哆維

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）,。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞,，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,，加入細(xì)胞培養(yǎng)液,，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),，500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,，離心收集細(xì)胞,，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,，重懸細(xì)胞,，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中,，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,，輕輕混勻，室溫避光孵育15min,。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后,，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）,。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置,。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),，PI為縱坐標(biāo),。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強度的背景熒光,，早期凋亡細(xì)胞僅有較強的綠色熒光,，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI,。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,，細(xì)胞核顯示紅色,，膜上有綠色光環(huán),。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存,。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM,，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

巨大芽孢桿菌磷脂酰肌激（PI3Kβ）抗體Anti-ATXN1 Antibody(PB0391)靶向核糖核(TR)

細(xì)腳棒束孢磷脂磷2結(jié)構(gòu)域3抗體Anti-ATXN2 Antibody八聚體轉(zhuǎn)錄因子(OTF2B)

枯草芽孢桿菌胞質(zhì)分裂調(diào)控蛋白1抗體Anti-ATXN2 Antibody八聚體轉(zhuǎn)錄因子(OTF2A)

黑曲霉磷化蛋白磷2A（PP2Aα）抗體Anti-ATXN3 Antibody(PB0392)艾杜糖硫酯(IDS)

釀酒酵母石骨癥相關(guān)蛋白PLEKHM1抗體Anti-AURKB Antibody癌癥促凝(CP)

大腸埃希氏桿菌血小板白C激底物同源結(jié)構(gòu)域M2抗體Anti-AVPR1A Antibody癌胚鐵蛋白(CEF)

花楸盤多毛孢血小板白C激底物同源結(jié)構(gòu)域M3抗體Anti-AVPR1A Antibody癌胚抗原(CEA/CD66)

雪白根霉多腺苷二磷多聚抗體(N端)Anti-AZIN2 Antibody癌抗原27-29(CA 27-29)

河流弧菌酪磷PTPδ抗體 蛋白酪磷D受體抗體Anti-AXL Antibody癌蛋白誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄物3(OIT3)

紫色小單孢菌(絳紅小單孢菌)鈣粘蛋白相關(guān)神經(jīng)受體8抗體Anti-B2M Antibody阿米巴(Amebiasis)

沙小單胞菌原鈣粘附蛋白18抗體Anti-B2M Antibody阿立新A(Orexin A)

托木爾峰假單胞菌原鈣粘附蛋白20抗體Anti-AZU1 Antibody阿拉伯半乳糖蛋白(AGPs)

球形賴芽孢桿菌原鈣粘附蛋白8抗體Anti-B3GNT8 Antibody阿黑皮原(POMC)

蚜蟲莫氏黑粉菌 魚精蛋白2抗體Anti-B2M Antibody吖啶橙(AO)

萄球菌piwi樣4蛋白抗體Anti-BAG2 Antibodyω干擾(IFN-ω/IFNB)

納西桿菌屬piwi樣3蛋白抗體Anti-BAG2 AntibodyκB抑制蛋白激(IKK)

叢毛單胞菌Comamonas│testosterone 質(zhì)量規(guī)格：>99%

小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,，標(biāo)準(zhǔn)品

黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
TNF-α分泌抑制劑地衣芽孢桿 改良MS-H培養(yǎng)基戊型肝炎病抗原Elisa

長枝木霉 WLN培養(yǎng)基前列腺E合2Elisa

土曲霉 硫代苯甲酰血紅Elisa

假單胞 梭屬測定用培養(yǎng)基阿霉Elisa

加利福尼亞犁頭霉 營養(yǎng)瓊脂內(nèi)皮受體AElisa

甲基營養(yǎng)型芽胞桿 SB培養(yǎng)基內(nèi)皮受體BElisa

膠孢 明膠磷酸鹽緩沖液Ⅲ型膠原Elisa

綠穗霉 C81V培養(yǎng)基脂蛋白脂Elisa

哈茨木霉 脆弱擬桿活化培養(yǎng)基肉湯肝脂Elisa

枯草芽孢桿 ModifiedSclohtens'Broth(MSB)鎖鏈Elisa

束狀盤孢 含1%水楊苷的PY培養(yǎng)基尿酸Elisa

Rhizobium 含1%棉籽糖的PY培養(yǎng)基半胱氨酸蛋白13Elisa

卡爾斯伯酵母 PPLO瓊脂增殖核抗原Elisa

解肝磷脂土地桿 精氨酸肉湯果糖二磷酸縮AElisa

中國臺灣卓貝爾氏 葡萄糖肉湯果糖二磷酸縮AElisa