以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
商品介紹:
Avanafil(TA-1790)是高活性PDE-5抑制劑,,IC50為5.2nM,對(duì)PDE1,,PDE6和PDE11活性較低,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):330784-47-9 別名:TA1790 純度:98.28% 分子量:483.95 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲(chǔ)存,。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,,500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。
3) 收集細(xì)胞后,,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,,共洗滌兩次,。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml,。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,,輕輕混勻,,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置,。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),,F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),,PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,,顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán),。
富馬替芬(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ropinirole HCl腫瘤/抗原13抗體包裝100g
富馬替芬雜質(zhì)I(10-氧基-4-(1-基-4-...英文名稱: Ropivacaine hydrochloride 鈣反應(yīng)因子抗體包裝25g
富馬伊布利特(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ropivacaine hydrochloride 分裂周期蛋白2亞型1抗體包裝100g
富馬異吡侖(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Rosuvastatin Calcium20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框74抗體包裝25g
甘膽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Rosuvastatin Calcium促腎上腺皮質(zhì)釋放激受體2抗體包裝100g
甘雙唑鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sitagliptin phosphate monohydrate20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框132抗體包裝25g
甘草二(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sitagliptin phosphate monohydrateIV型膠原蛋白/4型膠原蛋白/膠原蛋白4抗體包裝500g
甘精胰島(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Spectinomycin Hydrochloride 煙堿型乙酰膽堿受體B2抗體包裝1g
甘露(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Spectinomycin Hydrochloride 20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框70抗體包裝100g
甘羅溴銨(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tamsulosin hydrochloride 親環(huán)蛋白(親環(huán))PPIB抗體包裝1g
桿菌肽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: ithromycin 8號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框34抗體包裝25g
高藜蘆(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: misartanM鈣粘附分子抗體包裝5g
格列本脲(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: misartan凋亡誘導(dǎo)蛋白NALP3抗體包裝100g
格列吡 (標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Isoniazid周期B2抗體包裝25g
格列喹(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Isoniazid鈣腔蛋白包裝5g
: LMG2715=ATCC8199=DSM30176資源名稱: Pantoeastewartiisubsp.stewartii 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白6試劑盒烏藥內(nèi)酯;Linderane
產(chǎn)氣莢膜梭菌 毒A型Clostridium│perfringens Type A 質(zhì)量規(guī)格:potency>900ug/mg,BR鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4試劑盒維生K3;Menadione
: ATCC27853,、AS1.2387資源名稱: 銅綠假單胞菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR鋅指蛋白R(shí)IZ試劑盒維生B12;Vitamin B12
PDE-5抑制劑(Avanafil)腺苷活化蛋白激γ3抗體可溶性核因子κB受體活化因子配(sRANKL)檢測(cè)試劑盒sRANKL ELISA Kit
腺苷單磷活化蛋白激β2抗體可溶性Toll樣受體9(sTLR9/sCD289)檢測(cè)試劑盒sTLR9/sCD289 ELISA Kit
磷化周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1抗體可溶性Toll樣受體4(sTLR4)檢測(cè)試劑盒sTLR4 ELISA Kit
周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1抗體可溶性Toll樣受體2(sTLR2)檢測(cè)試劑盒sTLR2 ELISA Kit
磷化蛋白激B2抗體可溶性P選擇(sP-selectin)檢測(cè)試劑盒sP-selectin ELISA Kit
磷化鐵蛋白Fe65抗體可溶性Endoglin(ENG/sCD105)檢測(cè)試劑盒ENG/sCD105 ELISA Kit
磷化鐵蛋白Fe65抗體可溶性CD86(B7-2/sCD86)檢測(cè)試劑盒B7-2/sCD86 ELISA Kit
磷化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體可溶性CD40配體(sCD40L)檢測(cè)試劑盒sCD40L ELISA Kit
磷化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體可溶性CD30配體(sCD30L)檢測(cè)試劑盒sCD30L ELISA Kit