商品介紹:
EPZ015866(GSK591)是PRMT5選擇性抑制劑,和EPZ015666相比,,EPZ015866有更強(qiáng)的對(duì)PMT酶的抑制作用,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號(hào):1616391-87-7 別名:GSK591;GSK3203591 純度:98.71% 分子量:380.48 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:PRMT5抑制劑(GSK591)
英文名稱:EPZ015866
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
釀酒酵母TSK蛋白抗體Anti-GSDMD Antibody絨毛蛋白(CVL)
楊生毛栓菌味覺受體蛋白家族2亞基5抗體Anti-GSK3B(GSK3β) Antibody球蛋白(CYGB)
大腸埃希氏菌微管蛋白聚合促進(jìn)蛋白24Anti-GSN Antibody角蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)
釀酒酵母腱糖蛋白R抗體Anti-GSN Antibody(PB0198)間粘附分子5(ICAM5)
擬青霉瞬時(shí)受體電位蛋白12抗體Anti-GSN Antibody間粘附分子4(ICAM4)
葡萄座腔菌屬結(jié)構(gòu)蛋白家族2抗體Anti-GSR Antibody間粘附分子3(ICAM3)
黑附球菌先心病相關(guān)蛋白TBX1抗體Anti-GSTA1/A2/A3/A4/A5 Antibody間粘附分子2(ICAM2)
側(cè)孢短芽孢桿菌血管生成受體2抗體Anti-GSR Antibody間粘附分子1(ICAM1)
總狀共頭霉端粒調(diào)控因子抗體Anti-GSTA1/A2/A3/A4/A5 Antibody胱硫γ裂解(CSE)
Lysinibacillus微管蛋白抗體(免疫組化用抗體)TubulinβAnti-GSR Antibody附著蛋白相互作用蛋白(CYTIP)
硬結(jié)桿菌微管蛋白抗體(免疫組化用抗體)Tubulin βAnti-GSTA1/A2/A3/A4/A5 Antibody附著蛋白4(CYTH4)
異常威克漢姆酵母酪羥化抗體Anti-Gsta3 Antibody附著蛋白3(CYTH3)
空腸彎曲桿菌酪抗體Anti-GSTM1 Antibody附著蛋白2(CYTH2)
高山被孢霉胸腺β10抗體Anti-GSTA1/A2/A3/A4/A5 Antibody附著蛋白1(CYTH1)
紫色紅曲粘附分子1抗體Anti-GSTM3 Antibody分裂周期因子25(CDC25)
pLVX Tre3G胸腺基質(zhì)淋巴生成-1抗體(人)Anti-GSTP1 Antibody分裂周期因子23(CDC23)
腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白9/前列腺六跨膜上皮抗原4抗體卡氏黃褐桿菌人膀胱成纖維細(xì)胞
絲/蘇蛋白激31抗體普通變形菌人腎足突細(xì)胞
5-羥色胺受體2C抗體鈍齒棒桿菌人腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
分泌模塊化鈣結(jié)合蛋白2抗體平滑肌相關(guān)蛋白2枯草芽孢桿菌斯氏亞種人腎系膜細(xì)胞
PRMT5抑制劑(GSK591)半裸法氏殼 鋱/Tb凝血原片段F1+2Elisa
間型彎孢 二乙烯苯凝血抗凝血復(fù)合物Elisa
杰丁畢赤酵母 釓/Gd補(bǔ)體片斷5aElisa
淡紫擬青霉 銪/Eu血小板第四因子Elisa
猴頭 二乙烯苯β血小板球蛋白;β血栓環(huán)蛋白Elisa
蘇云金芽孢桿 釤/Sm多形核白彈性蛋白Elisa
大孢滑銹傘 二酸二異酯苯氨酸氫化Elisa
黃桿 釹/Nd苯氨酸氫化Elisa
施氏假單胞 鐠/Pr甘油一酯Elisa
蕈狀芽孢桿 4-氟-2-甲苯甘油二酯Elisa
密歇根棍狀桿標(biāo)記亞種 鈰/Ce血纖肽,;纖維蛋白肽AElisa
蘇云金芽孢桿蠟螟亞種 鑭/La促性腺釋放抗體Elisa
串珠鐮孢 (R,R)-(+)-2,2'-異亞基雙(4-叔丁基-2-惡唑啉)補(bǔ)體蛋白8Elisa
白酒紅鏈霉 硫/S一氧化氮合成Elisa
大腸埃希 2,2'-二羥基-4-甲氧基二苯甲酮色C氧化Elisa