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植物查爾酮異構(gòu)酶（CHI）試劑盒（ELISA）代測服務(wù)

植物查爾酮異構(gòu)酶（CHI）試劑盒（ELISA）代測服務(wù)

植物查爾酮異構(gòu)酶（CHI）試劑盒（ELISA）代測服務(wù)

需代測的老師們請注意，試劑盒寄送標(biāo)本注意事項：
委托單位的試驗材料和試劑等均須采用特快專遞形式郵寄，有低溫要求的,、固定要求的,，按低溫保存、固定防碎方法運輸,，以確保實驗物品的安全可靠。

l 本試劑盒用于體外定量檢測組織,、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中植物查爾酮異構(gòu)酶（CHI）的活性。

l 有效期：6個月

l 保存條件：2-8℃

l 本試劑盒僅供體外研究使用,，不用于臨床診斷

實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）,。往預(yù)先包被植物查爾酮異構(gòu)酶（CHI）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品,、HRP標(biāo)記的檢測抗體,，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的植物查爾酮異構(gòu)酶（CHI）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度,。
樣本處理及要

而未提供的試劑和器材

• 酶標(biāo)儀（450nm）
• 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL,、20-200uL、200-1000uL
• 37℃恒溫箱
• 蒸餾水或去離子水

試劑盒組成

備注：

1.  標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為：320,、160、80,、40,、20、0 U/ml

2.  經(jīng)過大量正常標(biāo)本檢驗,，標(biāo)本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內(nèi),，實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可。當(dāng)有部分樣本值超過zui大標(biāo)準(zhǔn)品濃度時,，可用樣本稀釋液將標(biāo)本進行適當(dāng)稀釋后再進行實驗,。

注意事項

• 嚴(yán)格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃,。使用后立即冷藏保存試劑,。
• 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體,。溫育過程中不要讓微孔干燥掉,。
• 消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值,。
• 底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,，已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。
• 避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果,。
• 在儲存和溫育時避免強光直接照射,。
• 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上,。
• 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性,。
• 不能使用過期產(chǎn)品,。
• 如果可能傳播疾病，所有的樣品都應(yīng)管理好,，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置,。

試劑準(zhǔn)備

試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。

20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋,，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水,。

操作步驟

1.   從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2.   設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.   樣本孔中加入待測樣本50μL,；空白孔不加,。
4.   除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL,，用封板膜封住反應(yīng)孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.   棄去液體,，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min,，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）,。
6.   每孔加入底物A,、B各50μL，37℃避光孵育15min,。
7.   每孔加入終止液50μL,，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值,。

實驗結(jié)果計算

以所測標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo),，標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,，并得到直線回歸方程,，將樣品的OD值代入方程,，計算出樣品的濃度,。

試劑盒性能

•  檢測范圍：10 U/ml – 320 U/ml,。
•  靈敏度：zui低檢測濃度小于1.0 U/ml。
•  特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng),。
•  重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,，板間變異系數(shù)小于15% 。

說明

• 由于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進行全面的鑒定與分析,，本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險,。
• zui終的實驗結(jié)果與試劑的有效性、實驗者的相關(guān)操作以及當(dāng)時的實驗環(huán)境密切相關(guān),，請務(wù)必準(zhǔn)備充足的標(biāo)本備份,。
• 不同批次的同一產(chǎn)品可能會有少許差別，如：檢測限,、靈敏度以及顯色時間等,，請依據(jù)試劑盒內(nèi)說明書進行實驗操作，電子版說明書僅作參考,。
• 只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果,，不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守本試劑盒的實驗說明才會得到的檢測結(jié)果,。