牛二胺氧化酶(DAO)ELISA試劑盒

英文名稱：Bovine DAO ELISA Kit
實驗類型：夾心法
檢測范圍：0.75 U/mL – 24 U/mL
zui低檢測限：0.1 U/mL
應用范圍：血清、血漿,、組織勻漿,、細胞培養(yǎng)物上清或其它相關液體（本產品僅供實驗室科研及非臨床用途）

牛二胺氧化酶(DAO)ELISA試劑盒僅供研究使用

牛二胺氧化酶(DAO)ELISA試劑盒實驗目的

本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿,、組織,、細胞上清及相關液體樣本中牛二胺氧化酶（DAO）的含量,。

有效期：6個月

保存條件：2-8℃

實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被牛二胺氧化酶（DAO）捕獲抗體的包被微孔中,，依次加入標本,、標準品、HRP標記的檢測抗體,，經過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的牛二胺氧化酶（DAO）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值）,，計算樣品濃度,。

牛二胺氧化酶(DAO)ELISA試劑盒組成

備注：

1. 標準品濃度依次為：24、12,、6,、3、1.5,、0 U/mL

2. 經過大量正常標本檢驗,，標本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內，實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可,。當有部分樣本值超過zui大標準品濃度時,，可用樣本稀釋液將標本進行適當稀釋后再進行實驗。

樣本處理及要求

1. 血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,，取上清即可檢測,，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融,。

2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑,，標本采集后30分鐘內于2 - 8°C 1000g離心20分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存,，但應避免反復凍融,。

3. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本：1000g離心20分鐘，取上清即可檢測,，或將標本放于-20℃或-80℃保存,，但應避免反復凍融。

注：標本溶血會影響zui后檢測結果,，因此溶血標本不宜進行此項檢測,。

需要而未提供的試劑和器材

1. 酶標儀（450nm）

2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL,、200-1000uL

3. 37℃恒溫箱

4. 蒸餾水或去離子水

試劑準備

試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡后方可使用,。

20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水,。

操作步驟

1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設置標準品孔和樣本孔,，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,；

3. 樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加,。

4. 除空白孔外,，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。

5. 棄去液體，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液（350μL）,，靜置1min，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干,，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。

6. 每孔加入底物A,、B各50μL,，37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL,，15min內,，在450nm波長處測定各孔的OD值。