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上海仁捷生物科技有限公司
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供應(yīng) CVNPF,神經(jīng)保護(hù)因子ELISA檢測(cè)試劑盒
| 試劑盒名稱 | 神經(jīng)保護(hù)因子ELISA檢測(cè)試劑盒 |  |
| 規(guī)格 | 48T/96T | |
| 品牌 | RENJIEBIO | |
| 檢測(cè)方法 | ELISA酶聯(lián)免疫法 | |
| 檢測(cè)波長 | 450nm | |
| 樣本 | 血清,、血漿,、細(xì)胞上清液等 | |
| 樣本體積 | 50~100ul | |
| 研究領(lǐng)域 | 神經(jīng)生物學(xué)、新陳代謝,、免疫學(xué)等 | |
| 使用范圍 | 僅用于科研實(shí)驗(yàn) | |
| 保存 | 2~8℃，避光保存 |
CVNPF,神經(jīng)保護(hù)因子ELISA檢測(cè)試劑盒操作流程如下：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔,；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl,；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,，加入純細(xì)胞裂解液100μl?！?br />（2）酶標(biāo)板置4℃,，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后,，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔,，浸泡1-2分鐘,，間歇搖動(dòng),。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次,。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl?！?br />（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),，孵育60min?！?br />（6）洗板,，同（4）?！?br />（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl,。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),，孵育60min,。
（9）洗板,，同（4）,。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl,，輕輕混勻10s,，置37℃暗處反應(yīng)15-20min?！?br />（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng),。
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,，zui終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2）,，以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后,，計(jì)算S/N值,。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
CVNPF,神經(jīng)保護(hù)因子ELISA檢測(cè)試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算
