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血液樣本是ELISA中最常見(jiàn)的生物液體樣本,，其中在檢測(cè)上有全血、血清,、血漿,、血凝塊和血細(xì)胞的區(qū)分，ELISA常用血清和血漿,。
血液是一種流體組織,，在心血管系統(tǒng)內(nèi)循環(huán)流動(dòng)，起著運(yùn)輸物質(zhì)的作用,。血液組織是結(jié)締組織的一種,，由血漿和血細(xì)胞組成。
血漿內(nèi)含血漿蛋白（白蛋白,、球蛋白,、纖維蛋白原）、脂蛋白等各種營(yíng)養(yǎng)成分以及無(wú)機(jī)鹽,、氧,、激素、酶,、抗體和細(xì)胞代謝產(chǎn)物等,。血細(xì)胞有紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板,。
哺乳類(lèi)的血液具有凝血機(jī)制,，血管破裂時(shí)，血小板會(huì)結(jié)集,，堵塞血管破口,，此時(shí)血漿中原本可水溶的血纖維蛋白等凝固成為XUEKUAI,，剩余的透明液體就叫做血清。
從采集樣本來(lái)說(shuō),，直接抽取采集的為全血,，呈紅色。靜置后1-2h,，會(huì)發(fā)生凝血反應(yīng),，形成血清（呈黃色透明液體）和血凝塊。在收集管中提前加入抗凝劑,，混勻后離心,，即可分離出血漿。
血清和血漿樣本的主要區(qū)別在于血漿中抗凝劑和凝血因子的影響,。
多數(shù)指標(biāo)中血漿樣本可以替代血清,，前提是該指標(biāo)不受抗凝劑成分和凝血因子的影響（如抗體類(lèi)項(xiàng)目），但生化指標(biāo)則不可用EDTA抗凝分離血漿,，因?yàn)镋DTA-K2此種抗凝劑不僅可以絡(luò)合重金屬M(fèi)g2+,，也會(huì)致使K+的含量上升，故生化指標(biāo)的最佳樣本是血清,。一般全血能收集到30-50%左右的血清/血漿,。
血紅蛋白類(lèi)指標(biāo)需采用溶血?jiǎng)┢扑檠?xì)胞后來(lái)進(jìn)行測(cè)定，凝血因子類(lèi)指標(biāo)需使用血漿,，其他部分指標(biāo)血清血漿中有較大差異,，血清血漿樣本類(lèi)型的選取，建議多參考國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn),，選擇合適的樣本類(lèi)型
真空采血管是采血材料中裝血液標(biāo)本的試管,，管內(nèi)有真空壓力，在護(hù)士采血操作穿刺達(dá)到血管后,，把穿刺針另一端插入試管,，血管內(nèi)的血液通過(guò)管內(nèi)真空壓力自然把血管內(nèi)的血液往試管內(nèi)排出，當(dāng)達(dá)到一定采血量后管內(nèi)的壓力自然減小,，不會(huì)繼續(xù)出血,。需要護(hù)士采血操作時(shí)使用，如果是事先把試管蓋打開(kāi),，管內(nèi)的壓力就會(huì)改變,，不是成負(fù)壓狀態(tài)就沒(méi)有真空壓力的作用。
除紅頭管無(wú)添加外,，其他采血管中均含有添加劑,，需采血后顛倒混勻5/8次。血清管凝集后離心分離出血清,，血漿管需要混勻后離心分離出血漿,。用于ELISA測(cè)試的樣本建議于 4℃保存24h 內(nèi)完成離心分離,，避免長(zhǎng)時(shí)間存放/凍融引起血細(xì)胞破碎，發(fā)生溶血反應(yīng)影響ELISA實(shí)驗(yàn),。
動(dòng)物采血管少量采血,，建議采用無(wú)菌無(wú)毒素的離心管收集，自然凝集后離心分離血清,；或抗凝離心管（肝素/EDTA分離血漿）,，輕輕顛倒混勻后離心分離血漿。
將清醒鼠裝入深顏色的布袋中,，將鼠身裹緊,，露出尾巴，用酒精涂擦或用溫水浸泡使血管擴(kuò)張,，剪斷尾尖后，尾靜脈血即可流出,，用手輕輕地從尾根部向尾尖擠捏,，可取到一定量的血液。取血后,，用棉球壓迫止血,。也可采用交替切割尾靜脈方法取血。用一鋒利刀片在尾尖部切破一段尾靜脈,，靜脈血即可流出,，每次可取0.3～0.5 ml，供一般血常規(guī)實(shí)驗(yàn),。三根尾靜脈可替換切割,，由尾尖向根部切割。由于鼠血易凝,，需要全血時(shí),，應(yīng)事先將抗凝劑置于采血管中，如用血細(xì)胞混懸液,，則立即與生理鹽水混合,。
左手持鼠，拇指與中指抓住頸部皮膚,，食指按壓頭部向下,，阻滯靜脈回流，使眼球后靜脈叢充血,，眼球外突,。右手持1％肝素溶液浸泡過(guò)的自制吸血器，從內(nèi)呲部刺入,，沿內(nèi)下眼眶壁,，向眼球后推進(jìn)4～5 mm,，旋轉(zhuǎn)吸血針頭，切開(kāi)靜脈叢,，血液自動(dòng)進(jìn)入吸血針筒,，輕輕抽吸血管(防止負(fù)壓壓迫靜脈叢使抽血更困難)，拔出吸血針,，放松手壓力,，出血可自然停止。也可用特制的玻璃取血管(管長(zhǎng)7～10 cm,，前端拉成毛細(xì)管,，內(nèi)徑0.1～1.5 mm，長(zhǎng)為1 cm,，后端管徑為0.6 cm),。必要時(shí)可在同一穿刺孔重復(fù)取血。此法也適用豚鼠和家兔,。
左手持鼠,，拇指與食指捏緊頭頸部皮膚，使鼠眼球突出,，右手持彎鑷或止血鉗,，鉗夾一側(cè)眼球部，將眼球摘出,，鼠倒置,，頭部向下，此時(shí)眼眶很快流血,，將血滴入預(yù)先加有抗凝劑的玻璃管內(nèi),，直至流血停止。此法由于取血過(guò)程中動(dòng)物未死,，心臟不斷跳動(dòng),，一般可取鼠體重4％～5％的血液量，是一種較好的取血方法,，但只適用一次性取血,。
動(dòng)物仰臥固定于鼠板上，用剪刀將心前區(qū)毛剪去,，用碘酒,、酒精消毒此處皮膚，在左側(cè)第3～4肋間用左手食指摸到心搏,，右手持連有4～5號(hào)針頭的注射器,，選擇心搏處穿刺，當(dāng)針頭正確刺入心臟時(shí),，鼠血由于心臟跳動(dòng)的力量,，血自然進(jìn)入注射器,。
實(shí)驗(yàn)者帶上棉手套，用左手抓緊鼠頸部位,，右手持剪刀,，從鼠頸部剪掉鼠頭迅速將鼠頸端向下，對(duì)準(zhǔn)備有抗凝劑的試管,，收集從頸部流出的血液,，小鼠可取血0.8～1.2 ml，大鼠可取血5～10 ml,。
麻醉動(dòng)物背位固定，一側(cè)頸部或腹股溝部去毛,，切開(kāi)皮膚,，分離出靜脈或動(dòng)脈，注射針沿動(dòng)靜脈走向刺入血管,。20 g小鼠可抽血0.6 ml,，300 g大鼠可抽血8 ml。也可把頸靜脈或頸動(dòng)脈用鑷子挑起剪斷,，用試管取血或注射器抽血,，股靜脈連續(xù)多次取血時(shí),，穿刺部位應(yīng)盡量靠近股靜脈遠(yuǎn)心端,。
