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血液樣本是ELISA中最常見的生物液體樣本,，其中在檢測(cè)上有全血,、血清、血漿,、血凝塊和血細(xì)胞的區(qū)分,，ELISA常用血清和血漿。
血液是一種流體組織,，在心血管系統(tǒng)內(nèi)循環(huán)流動(dòng),，起著運(yùn)輸物質(zhì)的作用。血液組織是結(jié)締組織的一種,，由血漿和血細(xì)胞組成,。
血漿內(nèi)含血漿蛋白（白蛋白、球蛋白,、纖維蛋白原）,、脂蛋白等各種營(yíng)養(yǎng)成分以及無機(jī)鹽、氧,、激素,、酶、抗體和細(xì)胞代謝產(chǎn)物等,。血細(xì)胞有紅細(xì)胞,、白細(xì)胞和血小板,。
哺乳類的血液具有凝血機(jī)制,，血管破裂時(shí),，血小板會(huì)結(jié)集，堵塞血管破口,，此時(shí)血漿中原本可水溶的血纖維蛋白等凝固成為XUEKUAI,，剩余的透明液體就叫做血清。
從采集樣本來說,，直接抽取采集的為全血,，呈紅色。靜置后1-2h,，會(huì)發(fā)生凝血反應(yīng),，形成血清（呈黃色透明液體）和血凝塊。在收集管中提前加入抗凝劑,，混勻后離心,，即可分離出血漿。
血清和血漿樣本的主要區(qū)別在于血漿中抗凝劑和凝血因子的影響,。
多數(shù)指標(biāo)中血漿樣本可以替代血清,，前提是該指標(biāo)不受抗凝劑成分和凝血因子的影響（如抗體類項(xiàng)目），但生化指標(biāo)則不可用EDTA抗凝分離血漿,，因?yàn)镋DTA-K2此種抗凝劑不僅可以絡(luò)合重金屬M(fèi)g2+,，也會(huì)致使K+的含量上升，故生化指標(biāo)的最佳樣本是血清,。一般全血能收集到30-50%左右的血清/血漿,。
血紅蛋白類指標(biāo)需采用溶血?jiǎng)┢扑檠?xì)胞后來進(jìn)行測(cè)定，凝血因子類指標(biāo)需使用血漿,，其他部分指標(biāo)血清血漿中有較大差異,，血清血漿樣本類型的選取，建議多參考國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn),，選擇合適的樣本類型
真空采血管是采血材料中裝血液標(biāo)本的試管,，管內(nèi)有真空壓力，在護(hù)士采血操作穿刺達(dá)到血管后,，把穿刺針另一端插入試管,，血管內(nèi)的血液通過管內(nèi)真空壓力自然把血管內(nèi)的血液往試管內(nèi)排出，當(dāng)達(dá)到一定采血量后管內(nèi)的壓力自然減小,，不會(huì)繼續(xù)出血,。需要護(hù)士采血操作時(shí)使用，如果是事先把試管蓋打開,，管內(nèi)的壓力就會(huì)改變,，不是成負(fù)壓狀態(tài)就沒有真空壓力的作用,。
除紅頭管無添加外，其他采血管中均含有添加劑,，需采血后顛倒混勻5/8次,。血清管凝集后離心分離出血清，血漿管需要混勻后離心分離出血漿,。用于ELISA測(cè)試的樣本建議于 4℃保存24h 內(nèi)完成離心分離,，避免長(zhǎng)時(shí)間存放/凍融引起血細(xì)胞破碎，發(fā)生溶血反應(yīng)影響ELISA實(shí)驗(yàn),。
動(dòng)物采血管少量采血,，建議采用無菌無毒素的離心管收集，自然凝集后離心分離血清,；或抗凝離心管（肝素/EDTA分離血漿）,，輕輕顛倒混勻后離心分離血漿。
將清醒鼠裝入深顏色的布袋中,，將鼠身裹緊,，露出尾巴，用酒精涂擦或用溫水浸泡使血管擴(kuò)張,，剪斷尾尖后,，尾靜脈血即可流出，用手輕輕地從尾根部向尾尖擠捏,，可取到一定量的血液,。取血后，用棉球壓迫止血,。也可采用交替切割尾靜脈方法取血,。用一鋒利刀片在尾尖部切破一段尾靜脈，靜脈血即可流出,，每次可取0.3～0.5 ml,，供一般血常規(guī)實(shí)驗(yàn)。三根尾靜脈可替換切割,，由尾尖向根部切割,。由于鼠血易凝，需要全血時(shí),，應(yīng)事先將抗凝劑置于采血管中,，如用血細(xì)胞混懸液，則立即與生理鹽水混合,。
左手持鼠,，拇指與中指抓住頸部皮膚，食指按壓頭部向下,，阻滯靜脈回流,，使眼球后靜脈叢充血,，眼球外突。右手持1％肝素溶液浸泡過的自制吸血器,，從內(nèi)呲部刺入,，沿內(nèi)下眼眶壁，向眼球后推進(jìn)4～5 mm,，旋轉(zhuǎn)吸血針頭,，切開靜脈叢，血液自動(dòng)進(jìn)入吸血針筒,，輕輕抽吸血管(防止負(fù)壓壓迫靜脈叢使抽血更困難)，拔出吸血針,，放松手壓力,，出血可自然停止。也可用特制的玻璃取血管(管長(zhǎng)7～10 cm,，前端拉成毛細(xì)管,，內(nèi)徑0.1～1.5 mm，長(zhǎng)為1 cm,，后端管徑為0.6 cm),。必要時(shí)可在同一穿刺孔重復(fù)取血。此法也適用豚鼠和家兔,。
左手持鼠,，拇指與食指捏緊頭頸部皮膚，使鼠眼球突出,，右手持彎鑷或止血鉗,，鉗夾一側(cè)眼球部，將眼球摘出,，鼠倒置,，頭部向下，此時(shí)眼眶很快流血,，將血滴入預(yù)先加有抗凝劑的玻璃管內(nèi),，直至流血停止。此法由于取血過程中動(dòng)物未死,，心臟不斷跳動(dòng),，一般可取鼠體重4％～5％的血液量，是一種較好的取血方法,，但只適用一次性取血,。
動(dòng)物仰臥固定于鼠板上，用剪刀將心前區(qū)毛剪去,，用碘酒,、酒精消毒此處皮膚,，在左側(cè)第3～4肋間用左手食指摸到心搏，右手持連有4～5號(hào)針頭的注射器,，選擇心搏處穿刺,，當(dāng)針頭正確刺入心臟時(shí)，鼠血由于心臟跳動(dòng)的力量,，血自然進(jìn)入注射器,。
實(shí)驗(yàn)者帶上棉手套，用左手抓緊鼠頸部位,，右手持剪刀,，從鼠頸部剪掉鼠頭迅速將鼠頸端向下，對(duì)準(zhǔn)備有抗凝劑的試管,，收集從頸部流出的血液,，小鼠可取血0.8～1.2 ml，大鼠可取血5～10 ml,。
麻醉動(dòng)物背位固定，一側(cè)頸部或腹股溝部去毛,，切開皮膚,，分離出靜脈或動(dòng)脈，注射針沿動(dòng)靜脈走向刺入血管,。20 g小鼠可抽血0.6 ml,，300 g大鼠可抽血8 ml。也可把頸靜脈或頸動(dòng)脈用鑷子挑起剪斷,，用試管取血或注射器抽血,，股靜脈連續(xù)多次取血時(shí)，穿刺部位應(yīng)盡量靠近股靜脈遠(yuǎn)心端,。
