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測(cè)定意義:羥自由基作用于體內(nèi)蛋白質(zhì),、核酸,、脂類等生物分子,造成細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能受損,,進(jìn)而導(dǎo)致體內(nèi)代謝紊亂引起疾病,。羥自由基清除能力是樣品抗氧化能力的重要指標(biāo)之一,在抗氧化類保健品和藥品研究中得到廣泛應(yīng)用,。
測(cè)定原理:H2O2/ Fe2+ 通過(guò)Fenton反應(yīng)產(chǎn)生羥自由基,,將鄰二氮菲- Fe2+水溶液中Fe2+氧化為Fe3+ ,導(dǎo)致536nm吸光度下降,,樣品對(duì)536nm吸光度下降速率的抑制程度,,反映了樣品清除羥自由基的能力。
需要的儀器,,耗材:恒溫水浴鍋,、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板和蒸餾水,。
樣本處理
1,、組織樣本的制備:稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液進(jìn)行冰浴勻漿,;10000g 4℃離心 10min,,取上清, 置冰上待測(cè),。
2,、血清、果汁等液體樣本可直接測(cè)定。
3,、提取物(或者藥物)可配制成一定濃度,,如 5mg/mL。