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磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶檢測(cè)試劑盒微量法
測(cè)定意義： PEPCK（EC 4.1.1.32）廣泛存在于動(dòng)物,、植物、微生物和細(xì)胞中,，催化草酰乙酸轉(zhuǎn)化為磷酸烯醇式丙酮酸,，是調(diào)節(jié)糖異生途徑的關(guān)鍵酶。
測(cè)定原理：PEPCK催化草酰乙酸生成磷酸烯醇式丙酮酸和CO2,，丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶進(jìn)一步依次催化NADH氧化生成NAD+,，在340nm下測(cè)定NADH下降速率，即可反映PEPCK活性,。
需要的儀器,，耗材:分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀,、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器,、微量石英比色皿/96孔板,、研缽、冰和蒸餾水,。
磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶檢測(cè)試劑盒微量法
樣本處理
組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織,，加入 1mL 提取液） 進(jìn)行冰浴勻漿，然后 8000g,，4℃,，離心 10min，取上清,，置冰上待測(cè),。
細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清,；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體 積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液）,，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功 率 20%或 200W,，超聲 3s,，間隔 10s，重復(fù) 30 次）,；8000g 4℃離心 10min,，取上清，置冰上待測(cè),。
血清（漿）樣本：直接檢測(cè),。
