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兔胰淀素ELISA試劑盒實驗方法

2021-3-4  閱讀(1006)

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兔胰淀素ELISA試劑盒實驗方法

 

樣本處理及要求

1.  血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,,然后1000×g離心20 分鐘,,取上清即可,,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,,但應(yīng)避免反復凍融,。
2.  血漿:EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,,并將標本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,,取上清即可檢測,,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,,但應(yīng)避免反復凍融。
3.  組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),,稱重后將組織剪碎,。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,,于冰上充分研磨,。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,,或反復凍融,。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測,。

4.  細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:1000×g離心20分鐘,,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,,但應(yīng)避免反復凍融,。

注:標本溶血會影響后檢測結(jié)果,因此溶血標本不宜進行此項檢測,。

 

 兔胰淀素ELISA試劑盒實驗方法

樣本收集保存

  1,、血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,,收集血液后,,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

  2,、血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清,。

  3,、細胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

  4,、組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

  5,、保存:如果樣本收集后不及時檢測,,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,,避免反復凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

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