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仁捷生物：人IL1β,、 IL8、 TNF-α ELISA試劑盒文獻(xiàn)期刊
內(nèi) 科 2018 年12 月 第13 卷 第6 期
早產(chǎn)兒血清,、腦脊液炎癥因子水平與腦損傷的關(guān)系分析
【摘要】 目的 探討早產(chǎn)兒血清,、腦脊液炎癥因子水平與腦損傷的關(guān)系。方法 選取腦損傷早產(chǎn)兒46 例作為腦損傷 組,，選取同期出生未合并腦損傷的早產(chǎn)兒46 例作為對照組,。采集兩組早產(chǎn)兒出生后第1 天、第 3 天,、第 7 天的血液及腦脊 液,，檢測比較兩組早產(chǎn)兒血液及腦脊液的白介素1β( IL1β) 、白介素8( IL8) ,、腫瘤壞死因子-α( TNF-α) 水平,。將腦損傷組 早產(chǎn)兒按病情的嚴(yán)重程度分為輕、中,、重度組,，比較分析三組早產(chǎn)兒血液及腦脊液的 IL1β、 IL8,、 TNF-α 水平。結(jié)果 腦損 傷組早產(chǎn)兒血清、腦脊液 IL1β,、 IL8,、 TNF-α 水平均顯著高于對照組( P ＜ 0． 05) ; 隨著出生時間( 病程) 的延長，腦損傷組早 產(chǎn)兒血清,、腦脊液以上各炎癥因子水平升逐漸高,，腦損傷對血清 IL1β、 IL8,、 TNF-α 水平的影響存在差異( P ＜0． 05) ,。不同 病情嚴(yán)重程度的三組腦損傷早產(chǎn)兒血清及腦脊液 IL1β、 IL8,、 TNF-α 水平比較,，差異有統(tǒng)計學(xué)意義( P ＜0． 05) ，各炎癥因子 水平均隨出生時間的延長而升高,，病情嚴(yán)重程度對炎癥因子水平的影響與時間具有交互作用( P ＜0． 05) ,。結(jié)論 早產(chǎn)兒血 清、腦脊液 IL1β,、 IL8,、 TNF-α 水平與其腦損傷的嚴(yán)重程度及病程有關(guān)。
實驗原理：
將目標(biāo)抗體包被于微孔板中,，制成固相載體,，向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本，其中的目標(biāo)連接于固相載體上的抗體結(jié)合,，然后加入微生物化的目標(biāo)抗體,，將未結(jié)合的生物素抗體洗凈后，加入HRP標(biāo)記和親和素,，再次*洗滌后加入TMB底物顯色,。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（O.D.值），計算樣品濃度,。
技術(shù)小提示：
1. 當(dāng)混合或重溶蛋白溶液時,，盡量避免起沫。
2. 為了避免交叉感染,，配置不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品,、上樣、加不同試劑都需要更換槍頭,。另外不同試劑請分別使用不同的移液槽,。
3. 每次孵育時，請正確使用封板膠可保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。
4. 混合后的顯色底物在上板前應(yīng)為無色,，請避光保存,；假如微孔板后，將由物色變成不同深度的藍(lán)色,。
5. 終止液上板順序應(yīng)同顯色底物上板順序一致,；加入終止液后，孔內(nèi)顏色由藍(lán)變黃,；若孔內(nèi)有綠色,，則表明孔內(nèi)液體未混勻；請充分混合,。
