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人乳腺珠蛋白(hMAM)ELISA試劑盒檢測范圍
英文名稱:Human hMAM ELISA Kit
實驗類型:夾心法
檢測范圍:12.5 ng/mL – 400 ng/mL
低檢測限:1.0 ng/mL
應(yīng)用范圍:血清、血漿,、組織勻漿、細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它相關(guān)液體(本產(chǎn)品僅供實驗室科研及非臨床用途)
人乳腺珠蛋白(hMAM)ELISA試劑盒實驗?zāi)康?/strong>
本試劑盒用于體外定量檢測血清,、血漿、組織,、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中人乳腺珠蛋白(hMAM)的含量,。
有效期:6個月
保存條件:2-8℃
實驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被人乳腺珠蛋白(hMAM)捕獲抗體的包被微孔中,,依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,,經(jīng)過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的人乳腺珠蛋白(hMAM)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),,計算樣品濃度,。
操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL,;空白孔不加,。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,,用封板膜封住反應(yīng)孔,,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A,、B各50μL,,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值,。