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CCND1 ELISA試劑盒檢測方法

2018-8-16  閱讀(1470)

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鴨細胞周期素D1(CCND1)ELISA試劑盒

英文名稱:Duck CCND1 ELISA Kit
實驗類型:夾心法
檢測范圍:12.5 pg/mL – 400 pg/mL
低檢測限:1.0 pg/mL
應用范圍:血清,、血漿,、組織勻漿,、細胞培養(yǎng)物上清或其它相關(guān)液體(本產(chǎn)品僅供實驗室科研及非臨床用途)

實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA),。往預先包被鴨細胞周期素D1(CCND1)捕獲抗體的包被微孔中,,依次加入標本,、標準品,、HRP標記的檢測抗體,,經(jīng)過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的鴨細胞周期素D1(CCND1)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),,計算樣品濃度,。

 

操作步驟

1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃,。

2. 設(shè)置標準品孔和樣本孔,,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

3. 樣本孔中加入待測樣本50μL,;空白孔不加,。

4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,,用封板膜封住反應孔,,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。

5. 棄去液體,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液(350μL),,靜置1min,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

6. 每孔加入底物A,、B各50μL,,37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL,,15min內(nèi),,在450nm波長處測定各孔的OD值。

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