目錄:愛必信(上海)生物科技有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)>>細(xì)胞檢測>> abs50193CTF-LTM 2D熒光細(xì)胞活力檢測試劑盒
供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | 10mL |
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貨號 | abs50193 | 主要用途 | 細(xì)胞活性檢測 |
描述 | 細(xì)胞活力檢測有多種方法,,如檢測染料排除的,檢測 ATP 產(chǎn)生的,檢測酶對底物降價(jià)活性的等,。熒光素酶檢測法應(yīng)用比較廣泛,是基于活細(xì)胞產(chǎn)生 ATP 的能力的,。由于是細(xì)胞檢測,,有時(shí)需要有內(nèi)參對照,由此產(chǎn)生 multiplex 分析需求,,即對同一多種分析方法同時(shí)檢測,,相互不干擾,彼此檢測機(jī)理不同,,如此可以進(jìn)行相關(guān)對比,,從而排除實(shí)驗(yàn)因素外的數(shù)據(jù)差異。國外 CellTiter Fluor (CTF)類產(chǎn)品就是基于這樣的原理設(shè)計(jì)的,。本公司自行研發(fā)推出了同類的熒光細(xì)胞活力檢測試劑盒(Fluorescent Cell Viability Assay Kit),,性能上與國外品牌產(chǎn)品無明顯差異。本產(chǎn)品是基于細(xì)胞蛋白酶對多肽產(chǎn)物的降解,,產(chǎn)生熒光信號,。細(xì)胞膜完整性受損時(shí),該蛋白酶就失去了對底物的降解活性,。CTF-LTM與熒光素酶試劑盒檢測原理不同,,檢測方法也不同,其檢測靈敏度次于熒光素酶法,,但是可以檢測到更早期的輕微的細(xì)胞損害,,兩個(gè)檢測相容性好,可以進(jìn)行multiplex 檢測,。 產(chǎn)品特性: 1,、性能 檢測信號,Window,,靈敏度與特異性與國外品牌同類產(chǎn)品類似,。 2、相容性 與CTG等常用分析試劑相容,,不形成相互影響,。 3、特征 對細(xì)胞早期膜損傷更敏感,。 4,、便捷 “加入-混合—溫育-檢測",整個(gè)實(shí)驗(yàn)步驟簡單,,易操作,。 產(chǎn)品組成: 蛋白酶底物,,緩沖液混合后灌裝于 10 mL 或 100 mL 的棕色瓶中及 2ml 管中,規(guī)格如下:
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使用方法 | 1,、細(xì)胞準(zhǔn)備: (1)在 96 孔或 384 孔細(xì)胞培養(yǎng)板鋪合適密度的待檢測細(xì)胞,。建議使用白板。 (2)準(zhǔn)備待檢化合物,。將合適濃度的待檢測化合物加到細(xì)胞板孔中,。培養(yǎng)液中有機(jī)溶劑濃度保持在1~2%以下。設(shè)立未加化合物的對照組,。根據(jù)項(xiàng)目需求繼續(xù)培養(yǎng)合適的時(shí)間,。 2、細(xì)胞活力檢測: (1)取出 CTF-LTM細(xì)胞活力檢測試劑,,在室溫平衡 20 分鐘,。輕搖混勻。 (2)配制 CTF 反應(yīng)液:CTF 底物是 100x 的,,用 CTF 緩沖液配成 1x 反應(yīng)液,,充分混勻,與待檢測細(xì)胞等體積混合使用,。 (4)向培養(yǎng)板孔內(nèi)加入等體積的 CTF 反應(yīng)液,,輕搖 20 秒鐘混勻,避光 37 ℃ 反應(yīng)60~90 分鐘,。 (5)在讀板儀上讀取熒光信號,,激發(fā)波長 380nm,發(fā)射波長 510nm,。 (6)根據(jù)需要,,繼續(xù)進(jìn)行下游的 multiplex 分析。 | |||||||||||||||
注意事項(xiàng) | 1,、試劑量:非經(jīng)嚴(yán)格驗(yàn)證,,不建議隨意改變反應(yīng)試劑用量。如使用 96 孔反應(yīng)板,,一般建議50uL培養(yǎng)液加等體積 CTF 反應(yīng)液,,后續(xù)檢測再加與 CTF 反應(yīng)液等體積的 multiplex 檢測反應(yīng)液(如CTG 反應(yīng)液)。其它反應(yīng)板作對應(yīng)體積調(diào)節(jié),。建議將底物分裝,,每次從底物stock 新鮮配制反應(yīng)液。 2,、必要時(shí)調(diào)整培養(yǎng)板反應(yīng)孔內(nèi)的實(shí)際剩余培養(yǎng)液體積,以保證 multiplex 分析總體積不超過200uL(96 孔板)或 40 uL(384 孔培養(yǎng)板),。 3,、讀板時(shí)間:在加入試劑并于 37 ℃溫育 30 分鐘后,,可以進(jìn)行讀板,但是其檢測靈敏度低于37 ℃溫育 60 分鐘或 90 分鐘的結(jié)果,。 | |||||||||||||||
基本信息 | ||||||||||||||||
儲(chǔ)存/保存方法 | -20℃及以下避光儲(chǔ)存,,有效期12個(gè)月。 |
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)