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產(chǎn)品介紹：
這款產(chǎn)品是在DeofectEU Transfection Reagent的基礎(chǔ)上進(jìn)一步優(yōu)化研發(fā)成功的專門用于質(zhì)粒DNA細(xì)胞轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)染試劑。它具有非常好的轉(zhuǎn)染性能,，可高效轉(zhuǎn)染多種貼壁細(xì)胞,、原代細(xì)胞和懸浮細(xì)胞，轉(zhuǎn)染效率在貼壁細(xì)胞中高達(dá)90%以上（EGFP質(zhì)粒）,。與目前市場(chǎng)上常見的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑不同,，它采用生物可降解材料配制，對(duì)細(xì)胞的毒性很低,，轉(zhuǎn)染后細(xì)胞死亡率不到10%,。這款產(chǎn)品使用也非常方便，先將轉(zhuǎn)染試劑與質(zhì)粒DNA混合,，再將轉(zhuǎn)染試劑-DNA復(fù)合物直接加入培養(yǎng)細(xì)胞中,，血清不影響其轉(zhuǎn)染效果，不必刻意添加或更換培養(yǎng)液,，操作十分簡(jiǎn)便。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
1,、強(qiáng)大的細(xì)胞轉(zhuǎn)染性能：可高效轉(zhuǎn)染多種貼壁細(xì)胞,、原代細(xì)胞和懸浮細(xì)胞，轉(zhuǎn)染效率在貼壁細(xì)胞中高達(dá)90%以上,；
2,、極低的細(xì)胞毒性：使用可降解生物材料，細(xì)胞毒性低,，轉(zhuǎn)染細(xì)胞死亡率不到10%,，大大降低了因細(xì)胞毒性對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果更為客觀,；
3,、操作簡(jiǎn)便，可用于含血清培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞的轉(zhuǎn)染,，轉(zhuǎn)染前后不需要更換培養(yǎng)液,。

方法步驟（以24孔板轉(zhuǎn)染為例）:

A,、細(xì)胞接種:
1、轉(zhuǎn)染前24小時(shí)左右對(duì)細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)接,，培養(yǎng)過(guò)夜,。
2、確保轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞密度為90%左右,。
3,、最好在轉(zhuǎn)染開始之前更換新鮮的含血清培養(yǎng)基，以防轉(zhuǎn)染后孵育階段細(xì)胞密度太大,、營(yíng)養(yǎng)不足導(dǎo)致細(xì)胞死亡,。

B、R /DNA轉(zhuǎn)染復(fù)合物制備(該步完成后應(yīng)立即進(jìn)行轉(zhuǎn)染):
1,、在1.5ml無(wú)菌離心管中加入50ul Trans buffer,，再加入適量的轉(zhuǎn)染試劑，見附表,。用移液器輕輕混勻后在室溫靜置5分鐘,。
2、在1.5ml無(wú)菌離心管中加入50ul Trans buffer,，再加入適量的DNA,，見附表。用移液器再次輕輕混勻后在室溫靜置5分鐘,。
3,、將DNA-Trans buffer混合物滴加至R-Trans buffer混合物中，用移液器輕輕混勻后在室溫靜置15-20分鐘后,，立即轉(zhuǎn)染,。

注意： R-Trans buffer混合物和DNA-Trans buffer混合物的混合順序非常重要，切勿顛倒,。注意：離心管最好使用聚丙烯離心管,。

C、轉(zhuǎn)染:
1,、將步驟B制備的轉(zhuǎn)染復(fù)合物滴加至培養(yǎng)基中,，邊加邊輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)板以使復(fù)合物均勻分布。加完后,，立即將培養(yǎng)板轉(zhuǎn)入培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng),。
2、培養(yǎng)12小時(shí)后即可觀察,，最佳觀察或收獲時(shí)間為24-48小時(shí),。
3、R在培養(yǎng)基中仍有較高的轉(zhuǎn)染效率，因此轉(zhuǎn)染前后不需要換成無(wú)血清或低血清培養(yǎng)基,。如果轉(zhuǎn)染后需要更換新鮮培養(yǎng)基,，請(qǐng)于加入R/DNA復(fù)合物12-24小時(shí)后進(jìn)行。

儲(chǔ)存/保存方法：

-20℃避光保存,，Trans buffer 可保存于2-8°C,，有效期1年，使用前輕輕混勻,。

技術(shù)指標(biāo)：

附表：不同培養(yǎng)體系推薦初始轉(zhuǎn)染條件

產(chǎn)品用途：

適用細(xì)胞系：293T,，A549,，B16F10，HEK 293,，HeLa,，Hepa 1-6，Hepa 1cLc7,，HepG2,，BHK-21，BNL.CL2,，BRL-3A,，C2C12，C6,，CHO-K1,，Clone 9，COS-1,，COS-7,，Daoy，DBTRG-05MG,，DI-TNC1,，DU 145，HLF-a,，Huh-7，K562,，KB,，KLN 205，Lυ2 (LLC1),，NCaP-FGC,，MCF-7，MEL,，Neuro-2a,，NIH3T3,，OVCAR3， PC3,，PC-12等,。

注意事項(xiàng)：

1、轉(zhuǎn)染前的細(xì)胞匯合度以90%左右為宜,，轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)應(yīng)保持良好,，不要有支原體污染。

2,、剛開始轉(zhuǎn)染,，建議進(jìn)行優(yōu)化實(shí)驗(yàn)，如24孔培養(yǎng)板,，每孔質(zhì)粒用量 0.8ug,，轉(zhuǎn)染試劑用量可選擇2.0ul、2.5ul,、3.0ul,、3.5ul進(jìn)行優(yōu)化。

3,、應(yīng)避免轉(zhuǎn)染復(fù)合物制備體系中存在血清,，因血清會(huì)干擾R與 DNA形成復(fù)合物，培養(yǎng)基中盡量不要使用抗生素,。

4,、如果需要穩(wěn)轉(zhuǎn)，請(qǐng)?jiān)谵D(zhuǎn)染24-48小時(shí)后加入篩選培養(yǎng)基,。

5,、本試劑盒主要用于質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染，如需質(zhì)粒DNA,、RNA,、siRNA均可轉(zhuǎn)染的試劑，請(qǐng)選擇核酸轉(zhuǎn)染試劑盒（#abs60259）,。