目錄:愛必信(上海)生物科技有限公司>>免疫學試劑>>WB常用試劑>> abs9249檸檬酸鈉-EDTA抗原修復(fù)液
CAS | - | 純度 | - |
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分子量 | - | 分子式 | - |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100ml |
貨號 | abs9249 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 石蠟切片,;冰凍切片等樣品 |
產(chǎn)品描述:
細胞或組織用多聚甲醛,、甲醛或其它醛類試劑固定后,,會導(dǎo)致蛋白之間的交聯(lián)(cross-link),,遮蔽樣品的抗原位點,導(dǎo)致免疫染色時染色信號減弱,,甚至出現(xiàn)一些假陽性染色結(jié)果,。檸檬酸鈉-EDTA抗原修復(fù)液(40×) (Citrate-EDTA Antigen Retrieval Solution(40×))采用了常用的檸檬酸鈉緩沖液和EDTA,結(jié)合了兩者修復(fù)抗原的優(yōu)點,,并經(jīng)過適當優(yōu)化,,可以更加有效地去除醛類固定試劑導(dǎo)致的蛋白之間的交聯(lián),充分暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位,,從而大大改善免疫染色效果,。適用于石蠟切片、冰凍切片等樣品,。
通常石蠟切片都需進行抗原修復(fù)處理,,而冰凍切片可以不進行抗原修復(fù)處理??乖迯?fù)會大大改善石蠟切片的免疫染色效果,,但對于冰凍切片的染色效果很多文獻資料表明也有顯著改善。特別是當冰凍切片免疫染色效果欠佳時,,可以考慮嘗試進行抗原修復(fù),。從原理上來看,無論冰凍切片還是細胞爬片等,,只要是用多聚甲醛,、甲醛或其它醛類試劑固定的樣品,進行抗原修復(fù)都會有效去除蛋白之間的交聯(lián),,充分暴露抗原表位,,從而大大改善免疫染色效果。
使用方法:
1,、對于石蠟切片:
(1)脫蠟:切片在二甲苯中脫蠟 2×5min,。無水乙醇 2×5min。90%乙醇2×5min,,70%乙醇 5min,。蒸餾水 2×5min。
(2)抗原修復(fù):將切片浸泡于抗原修復(fù)液(1×)中,,95-100℃加熱約 10-30min(最佳的加熱時間需根據(jù)不同的樣品和目的蛋白自行摸索),。抗原修復(fù)液(1×)使用前需預(yù)熱到 95-100℃,。加熱可以使用水浴鍋或微波爐,。如果使用微波爐加熱,需注意避免修復(fù)液暴沸。隨后大約在 20-30min 冷卻至室溫,。用免疫染色洗滌液洗滌 1-2 次,,每次3-5min。即可進行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟,。
2,、冰凍切片:用免疫染色洗滌液洗滌切片 5min??乖迯?fù)的過程如石蠟切片的抗原修復(fù)過程,。
3、其它樣品的抗原修復(fù),,可以參考石蠟切片的步驟進行,。
注意事項:
1、為了您的自身安全,,使用試劑前,請做好防護,,如穿實驗服,,戴手套等。
2,、檸檬酸鈉-EDTA 抗原修復(fù)液(40×)使用前須用蒸餾水或 MilliQ 水稀釋 40 倍,,配成抗原修復(fù)液(1×)。