概述 |
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描述 | 組織微環(huán)境中有復(fù)雜的細胞組成,,這些細胞的表型、狀態(tài),、豐度,、分布都有著重要的生物學意義和臨床價值。借助抗體染色可以將其在組織原位上呈現(xiàn)出來,。免疫組化染色是一種研究組織形態(tài)和原位蛋白表達的常見技術(shù),,常規(guī)IHC檢測只能展示單一指標,難以呈現(xiàn)復(fù)雜的組織微環(huán)境中的細胞組成,、狀態(tài)和關(guān)系,,而這些信息對疾病的診斷和治療至關(guān)重要! 酪氨信號放大技術(shù)原理:類似常規(guī)免疫組化的DAB顯色方法,,TSA技術(shù)同樣采用HRP標記的二抗,,HRP催化加入體系的熒光素底物,生產(chǎn)活化熒光底物,,活化底物可與抗原上的酪氨酸共價結(jié)合,,使樣品上穩(wěn)定的共價結(jié)合熒光素。之后用熱修復(fù)法洗去非共價結(jié)合的抗體,,在換下一種一抗來第二輪孵育,,換另一種熒光素底物,如此往復(fù)就可實現(xiàn)多重標記,。 |
檢驗原理 | 多重熒光免疫組化染色是基于抗原,、抗體特異性結(jié)合的原理,選用辣根過氧化物酶(HRP)標記的二抗抗體,,對試劑盒中的熒光染料進行活化,,將信號共價結(jié)合到抗原上。借助于不同的熒光染料標記,,通過多輪染色循環(huán)實現(xiàn)組織或細胞的原位多靶點染色,。 |
產(chǎn)品組成 | TSA單色熒光染料520、TSA單色熒光染料570,、TSA單色熒光染料650,、信號放大反應(yīng)液、抗兔HRP標記二抗,、抗熒光淬滅封片劑,、DAPI. |
應(yīng)用 | 四色多重熒光免疫組化染色試劑盒主要用于人源或小鼠組織、石蠟切片,、TMA芯片的免疫組化染色,。 |
使用方法 | 1. 熒光染料的稀釋:若染料為干粉,使用100ulDMSO溶解,制成100X染料母液,;若染料為液態(tài)表示出廠即為DMSO溶解的100X母液,;使用信號放大反應(yīng)液按1:100稀釋制備染料工作液(現(xiàn)用現(xiàn)配);DAPI使用無菌水按1:100稀釋制備工作液,。 2. 二抗的使用:試劑盒為抗兔二抗,,適用小鼠組織,實驗前請核實一抗種屬是否匹配,。人源樣本請參考(#abs50012),。 |
性能 |
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儲存/保存方法 | 四色多重熒光免疫組化染色試劑盒 熒光染料需避光保存,2~8℃儲存,,收到貨起有效期為12個月,。 |
注意事項 | 1. 本試劑盒只用于免疫組化,不做其他用途,。 2. 本試劑盒僅限于專業(yè)人員使用,。 3. 應(yīng)采用適當?shù)姆雷o措施,以避免試劑同皮膚和眼睛接觸,。 4. 超過有效期的試劑活性可能降低,,因此不得使用超過有效期的試劑。 5. 若將本試劑盒的染色組分與其他公司的產(chǎn)品混合使用,,在染色過程中可能出現(xiàn)異常情況,。 6. 脫蠟不*,容易影響染色效果,。 7. 為了防止可能出現(xiàn)的假陰性,、假陽性結(jié)果,實驗過程中需有陽性對照及陰性對照同時進行,。 8. 使用本試劑盒中所產(chǎn)生的各種廢棄物都應(yīng)按照《醫(yī)療廢物管理條例》進行處理,。 |
參考文獻 |
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參考文獻 | 1.Dabbs David J. 診斷免疫組織化學(M). 北京:北京大學醫(yī)學出版社,2008.9. 2.【美】Ed Harlow, David Lane. 抗體技術(shù)指南(M). 北京:科學出版社,,2002:79-80,105. 3.Stack, E. C., et al., Multiplexed immunohistochemistry, imaging, and quantitation: a review, with an assessment of Tyramide signal amplification, multispectral imaging and multiplex analysis. Methods, 2014 70 (1): 46-58. 4.錢幫國. 焦磊. 多標記免疫熒光染色及多普成像技術(shù)在組織學研究中的應(yīng)用. 中國組織化學與細胞化學雜志, 2017 (4): 373-382. |
溫馨提示:本產(chǎn)品僅作科研實驗使用,,不支持臨床等研究 |
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