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檢測原理：

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測技術,。特異性抗人MMP-9抗體預包被在高親和力的酶標板上,。酶標板孔中加入標準品,、待測樣本和生物素化的檢測抗體，經(jīng)過孵育,，樣本中存在的MMP-9與固相抗體和檢測抗體結合,，形成免疫復合物。洗滌去除未結合的物質(zhì)后,，加入辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP),。洗滌后，加入顯色底物,，避光顯色,。加入終止液終止反應，在450 nm波長(參考校正波長540nm或570nm)測定吸光度值,。

檢測類型：雙抗夾心法

形式：預包被96孔板

檢測樣本類型：細胞上清液,，血清，血漿

上樣量：100ul

試劑盒組分：

預包被96孔板,、標準品,、MMP-9檢測抗體、稀釋用緩沖液,、顯色液（A,、B）、洗滌液,、終止液,、SA-HRP、封板膜和說明書一份,。

靈敏度：0.156ng/mL

檢測范圍：31.2 - 2,000 pg/mL

回收率范圍：85-104%

保存方法：2-8℃

標準曲線圖

背景：

基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）也被稱為matrixins,，是鋅鈣依賴性蛋白水解酶家族成員，可分解細胞外基質(zhì)（ECM）,，在不同的亞細胞環(huán)境中,，參與多種分子的加工過程。MMPs在眾多生理學進程中發(fā)揮重要功能,，例如胚胎發(fā)育,、形態(tài)發(fā)生、繁殖以及組織重構,。也參與炎癥以及自身免疫疾病,，例如關節(jié)炎、癌癥和心血管疾病,。新合成的MMPs的量主要在轉錄水平被調(diào)節(jié),，已經(jīng)存在的MMPs的蛋白水解活性，不僅受控于酶原的活性,，也受控于內(nèi)源性抑制劑對酶活性的抑制,，例如α2-巨球蛋白，以及金屬蛋白酶組織抑制劑（TIMPs）。

MMP-9（也稱明膠酶B,、92kDa IV型膠原酶,、92kDa明膠酶、V型膠原酶）作為糖基化酶原被分泌出來,。酶原的活化涉及到N-末端前體區(qū)域的蛋白水解去除，終形成82kDa的活性酶,?；钚匀?span style="font-size:14px !important">MMP-9與小鼠和大鼠的MMP-9分別有72%和74%的氨基酸序列同源性。除了鋅結合位點,，催化結構域還包含三個連續(xù)的纖連蛋白II型同源單位,，可結合明膠。富含脯氨酸的鉸鏈區(qū)將催化結構域連接到C-末端血紅素樣結構域,。在體外實驗中,，酶原經(jīng)4-氨基苯基乙酸乙酯（APMA）處理后，不僅能產(chǎn)生活性酶,，還能產(chǎn)生活性與其相當?shù)?span style="font-size:14px !important">C-末端截短形式,。MMP-9可降解ECM中的成分，尤其對變性膠原（明膠）有非常高的特異性,。MMP-9也可裂解III,、IV、V,、XI型膠原,，以及彈性蛋白、巢蛋白-1 和玻連蛋白,。MMP-9還可裂解多種趨化因子和生長因子（例如IL-1β,、CXCL8/IL-8、CXCL7,、CXCL4,、CXCL1、Latent TGF-β,、膜結合TNF-α,、VEGF和FGF basic），β-淀粉樣蛋白,、P物質(zhì),、髓鞘堿性蛋白。此動作可提高或降低這些可溶性因子的生物活性,，也可使它們從與ECM的聯(lián)合中被釋放出來,。MMP-9也可通過各種各樣的膜蛋白觸發(fā)信號通路，或是誘導它們從細胞膜上脫落從而抑制信號通路（例如CD44,，E-鈣黏蛋白,、整合素,、ICAM-1和IL-2 Rα）。

MMP-9由多種正常細胞和轉化細胞產(chǎn)生,，包括中性粒細胞,、單核細胞、巨噬細胞,、星形膠質(zhì)細胞,、纖維原細胞、破骨細胞,、軟骨細胞,、角化細胞、內(nèi)皮細胞和上皮細胞,。它影響生理性和病理性的血管生成和血管重構,。活化的中性粒細胞釋放MMP-9前體,，不結合TIMP-1,，允許促血管生成的FGF-2從ECM中釋放出來。MMP-9和TIMP-1的復合物不能誘導FGF-2的釋放,。中性粒細胞來源的MMP-9可加劇炎癥反應,，通過產(chǎn)生來自膠原多肽來誘導額外的中性粒細胞MMP-9的釋放。MMP-9在骨形成和重構,、誘導行為敏化與應答,、神經(jīng)元突觸重構的調(diào)控、著床過程中的滋養(yǎng)層入侵,、絲氨酸蛋白酶抑制劑α1的活化中也發(fā)揮重要作用,。MMP-9介導的粘附分子的脫落對于腫瘤細胞的侵襲也有直接作用。

MMP-9的循環(huán)水平在許多炎癥失調(diào)疾病中有所升高,，包括管腔內(nèi)血栓的形成,、動脈粥樣硬化、克羅恩氏病,、丙型肝炎病毒感染,、結腸直腸癌以及杜氏肌營養(yǎng)不良。MMP-9與TIMP-1的比例在多發(fā)性硬化癥血清和囊性纖維化痰中升高,，但在巨細胞病毒感染的血清中降低,。游離MMP-9的水平、MMP-9與脂質(zhì)運載蛋白-2/NGAL復合物的水平分別在卵巢癌患者,、子宮尿道感染患者的尿液中升高,。