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檢測原理：

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù),。特異性抗人EGF抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品,、待測樣本和生物素化的檢測抗體,，經(jīng)過孵育，樣本中存在的EGF與固相抗體和檢測抗體結(jié)合,，形成免疫復(fù)合物,。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP),。洗滌后,，加入顯色底物,，避光顯色。加入終止液終止反應(yīng),，在450 nm波長(參考校正波長540nm或570nm)測定吸光度值,。

檢測類型：雙抗夾心法

形式：預(yù)包被96孔板

檢測樣本類型：細(xì)胞上清液，血清,，血漿

上樣量：100ul

試劑盒組分：

預(yù)包被96孔板,、標(biāo)準(zhǔn)品、EGF檢測抗體,、稀釋用緩沖液,、顯色液（A、B）,、洗滌液,、終止液、SA-HRP,、封板膜和說明書一份,。

靈敏度：0.089-0.740pg/mL

檢測范圍：3.9 - 250 pg/mL

回收率范圍：96-103%

保存方法：2-8℃

標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

背景：

EGF（表皮生長因子，又稱Urogastrone）前體是生長因子EGF家族的Group I成員,，分子量為185kDa,。Group I成員是結(jié)合并活化表皮生長因子受體（EGF R）的分子。EGF家族成員被合成為I型跨膜（TM）蛋白,，且由蛋白水解生成可溶形式,。人表皮生長因子（EGF）是一個長為1185個氨基酸前體分子形式的一個片段，包含1010個氨基酸細(xì)胞外區(qū)域,、21個氨基酸TM區(qū)域和153個氨基酸胞質(zhì)域,。這個前體的胞外域（ECD）有三個主要的結(jié)構(gòu)模塊。其中包括9個BLDLR重復(fù),、1個血管性血友病因子A區(qū)域和9個類EGF重復(fù),，并在近膜區(qū)包含了成熟EGF分子的53個氨基酸的結(jié)構(gòu)（為前體形式的第971位至1023位氨基酸）。這個跨膜185kDa的亞型（氨基酸21-1023）,，存在于大多數(shù)體液中,。這個過程同時產(chǎn)生了大量40-100kDa的蛋白片段，可能為蛋白水解降解產(chǎn)物,。6kDa成熟EGF亞型的產(chǎn)生過程尚不清楚,。它可能源自細(xì)胞內(nèi)部，也可能源于細(xì)胞表面,，通過細(xì)胞表面的膜結(jié)合絲氨酸酶水解可溶性的160kDa前體或這個前體水解以后生產(chǎn)的70kDa的分子亞型而來,。

值得注意的是，成熟形式的EGF,、185kDa跨膜蛋白,、已被水解但尚未加工的循環(huán)型分子和160kDa前體分子都具有生物學(xué)活性,。而這些生物學(xué)活性主要是因為有EGF肽段嵌入在這些前體分子中。其它類型EGF的修飾都不具備結(jié)合EGF受體的活性,。編碼EGF的基因在表達(dá)EGF蛋白過程中存在4種可能的剪切體,，但都不影響成熟EGF的序列。其中兩種剪切體發(fā)生在胞外區(qū)序列,，分別刪除了第913位至953位的氨基酸和第314至355位的氨基酸,。另外兩種剪切體則涉及EGF的胞內(nèi)區(qū)域，分別以12個氨基酸替換了第1125位至1207位的氨基酸和以17個氨基酸替換了第1136-1207位的氨基酸,。成熟的人EGF與小鼠,、大鼠和豬的EGF的同源性分別是70%、70%和85%,。已知表達(dá)EGF 的細(xì)胞包括血小板,、大腦神經(jīng)元、星狀膠質(zhì)細(xì)胞和小腦浦肯野細(xì)胞,、布魯納細(xì)胞（十二指腸）和頜下腺細(xì)胞,、不著色的纖毛上皮和垂體前葉細(xì)胞。EGF有許多不同的生理作用,。目前廣泛認(rèn)可的EGF功能主要基于EGF受體-配體的結(jié)合而實現(xiàn),。而EGF受體也能和其它EGF家族的蛋白結(jié)合，進(jìn)而形成異源多聚體并與其它EGF受體家族成員二聚化,，或者和其它跨膜蛋白如PDGF R?和HGF受體產(chǎn)生關(guān)聯(lián),。在任何一種情況下，EGF都可以對胎兒和成人組織產(chǎn)生作用,。在胎兒,，EGF影響雙陰性-雙陽性階段的胸腺細(xì)胞生長和分化。在神經(jīng)元形成過程中,，EGF似乎也可以刺激神經(jīng)膠質(zhì)神經(jīng)元的生成并促進(jìn)其上皮化,。后，它能抑制脂肪細(xì)胞的成熟,，從而增加前脂肪細(xì)胞數(shù)量,。在成人，EGF可以在乳腺的乳生成過程中發(fā)揮作用,，也可使纖維細(xì)胞有絲分裂，ECM離解和遷移,，廣泛地影響生長因子相關(guān)的各種作用,。

EGF受體即表皮生長因子受體（也稱為HER1和ErbB1），其激活機制尚不明確,。目前的研究認(rèn)為每一個EGF分子和一個EGF受體分子有兩個結(jié)合位點,，這會迫使受體產(chǎn)生構(gòu)象變化,，而和第二個EGF-EGF R復(fù)合物結(jié)合。這種二聚體即具有實際功能的EGF受體,。ErbB2也可以和EGF受體形成異源二聚體,，但不能和EGF結(jié)合。這可能是因為ErbB2 天然以二聚體的形式存在,，掩蓋了其配體結(jié)合的位點,，而使配體無法與其結(jié)合。因此,，它需要結(jié)合一個已經(jīng)激活的EGF-EGF R復(fù)合體才能形成一個功能性的EGF受體,。而由于內(nèi)在的靜電斥力作用，ErbB2自身無法形成同源二聚體,。EGF也只有在高濃度的環(huán)境下也能和ErbB3：ErbB2形成異源多聚體,。這個過程的重要性，目前仍是未知的,。EGF R的選擇性剪切亞型存在于腫瘤細(xì)胞中,，并可能參與腫瘤發(fā)生或使細(xì)胞對EGF 受體抑制劑敏感。