日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

概述

巨噬細(xì)胞是免疫系統(tǒng)中的重要組成部分,，在保護(hù)機(jī)體免受感染和維持組織平衡方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用,。為了研究巨噬細(xì)胞的功能和機(jī)制,，科學(xué)家們創(chuàng)造了一種不需要從患者或動(dòng)物采集組織的模型，即THP-1細(xì)胞,。THP-1細(xì)胞系最初來(lái)自一位急性單核細(xì)胞白血病患者的血液,，屬于懸浮細(xì)胞，有分化為多種巨噬細(xì)胞的能力,，成為巨噬細(xì)胞分化的好選擇,。THP-1細(xì)胞可通過(guò)化學(xué)物質(zhì)處理、細(xì)胞因子刺激或共培養(yǎng)等方法,，誘導(dǎo)其分化為具有巨噬細(xì)胞特性的細(xì)胞群,。

機(jī)理

細(xì)胞因子刺激是一種常見的THP-1細(xì)胞誘導(dǎo)分化方法。IL-4和IL-13等細(xì)胞因子能夠促使THP-1細(xì)胞分化為巨噬細(xì)胞,，并啟動(dòng)特定的信號(hào)通路,，進(jìn)而調(diào)控細(xì)胞功能。這種方法可以模擬體內(nèi)的免疫調(diào)節(jié)過(guò)程,，并提供一種便捷的方式來(lái)研究巨噬細(xì)胞在炎癥反應(yīng),、免疫調(diào)節(jié)和抗腫瘤等方面的功能。

巨噬細(xì)胞被分為兩種主要類型：M1型巨噬細(xì)胞和M2型巨噬細(xì)胞,。THP-1細(xì)胞通常用佛波酯(PMA)(abs9107)誘導(dǎo)分化為巨噬細(xì)胞,，然后在PMA仍然存在的情況下：

加入脂多糖(LPS)(誘導(dǎo)濃度：100ng/mL)(abs47014848)、IFN-γ(誘導(dǎo)濃度：20ng/mL)(abs04123)培養(yǎng)48h,，誘導(dǎo)其向M1極化,；

加入IL-4(誘導(dǎo)濃度：20ng/mL)(abs04698)、IL-13(誘導(dǎo)濃度：20ng/mL)(abs04079)培養(yǎng)48h,，誘導(dǎo)其向M2極化,；

最后，在無(wú)刺激物和無(wú)PMA的情況下,，用無(wú)血清RPMI-1640基礎(chǔ)培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,，可保持72h。

誘導(dǎo)步驟

THP-1誘導(dǎo)分化成巨噬細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

（1）THP-1細(xì)胞的培養(yǎng)：更多培養(yǎng)技巧可查看THP-1細(xì)胞培養(yǎng)攻略

THP-1（人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞）細(xì)胞基本信息

THP-1（人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞）

（2）誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配置：向1640wan全培養(yǎng)基（含胎牛血清）里加入PMA（誘導(dǎo)濃度：100ng/mL）制成誘導(dǎo)培養(yǎng)基；

（3）接種細(xì)胞：收集THP-1細(xì)胞并進(jìn)行計(jì)數(shù),，用誘導(dǎo)培養(yǎng)基重懸細(xì)胞沉淀調(diào)整細(xì)胞密度為5*10^5/mL,，將細(xì)胞種入六孔板，每孔加入細(xì)胞懸液2mL,；

（4）誘導(dǎo)培養(yǎng)：48h后,，顯微鏡下觀察巨噬細(xì)胞構(gòu)建成功；

（5）誘導(dǎo)成功的標(biāo)志：單核細(xì)胞THP-1用PMA誘導(dǎo)后,，由懸浮式生長(zhǎng)變成貼壁生長(zhǎng),，由圓形變成不規(guī)則形態(tài)，體積進(jìn)一步增大,，細(xì)胞漿疏松,，細(xì)胞核增大明顯，可見大量明顯細(xì)胞器,，胞膜周圍可見少量突起,。

PMA誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞培養(yǎng)的相差顯微照片

用PMA孵育THP-1細(xì)胞48h，顯示THP-1(40X)在(A)誘導(dǎo)前(B)誘導(dǎo)后的形態(tài)學(xué)變化,。它們的形態(tài)由圓形變?yōu)榧?xì)長(zhǎng)和扁平,。

巨噬細(xì)胞進(jìn)一步誘導(dǎo)成M1型實(shí)驗(yàn)步驟：

（1）誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配置：向1640wan全培養(yǎng)基（含胎牛血清）里加入PMA（誘導(dǎo)濃度：100ng/mL）、脂多糖(LPS)(誘導(dǎo)濃度：100ng/mL)(abs47014848),、IFN-γ(誘導(dǎo)濃度：20ng/mL)（abs04123）,，制成誘導(dǎo)培養(yǎng)基；

（2）誘導(dǎo)培養(yǎng)：將已經(jīng)誘導(dǎo)成的巨噬細(xì)胞上清棄除,，加入誘導(dǎo)培養(yǎng)基（6孔板,，每孔2mL）培養(yǎng)48h，誘導(dǎo)其向M1極化,。48h后,，顯微鏡下觀察M1細(xì)胞是否構(gòu)建成功；

（3）最后,，在無(wú)刺激物和無(wú)PMA的情況下,，用無(wú)血清RPMI-1640基礎(chǔ)培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，可保持72h,。

巨噬細(xì)胞進(jìn)一步誘導(dǎo)成M2型實(shí)驗(yàn)步驟：

（1）誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配置：向1640wan全培養(yǎng)基（含胎牛血清）里加入PMA（誘導(dǎo)濃度：100ng/mL）,、加入IL-4(誘導(dǎo)濃度：20ng/mL)（abs04698）、IL-13(誘導(dǎo)濃度：20ng/mL)（abs04079）制成誘導(dǎo)培養(yǎng)基,；

（2）誘導(dǎo)培養(yǎng)：將已經(jīng)誘導(dǎo)成的巨噬細(xì)胞上清棄除,，加入誘導(dǎo)培養(yǎng)基（6孔板，每孔2mL）培養(yǎng)48h,，誘導(dǎo)其向M2極化,。48h后,，顯微鏡下觀察M2細(xì)胞是否構(gòu)建成功；

（3）最后,，在無(wú)刺激物和無(wú)PMA的情況下,，用無(wú)血清RPMI-1640基礎(chǔ)培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，可保持72h,。

THP-1極化進(jìn)入M1和M2巨噬細(xì)胞圖

M1型形態(tài)多樣,，偽足較多，分叉明顯,，M2型形態(tài)均一,，多呈長(zhǎng)條型，分叉不明顯,。

M1和M2型鑒定

上述形態(tài)是初步的鑒別方法,，更準(zhǔn)確的可以通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)一般是通過(guò)一些巨噬細(xì)胞標(biāo)志物進(jìn)行的，常見的M1巨噬細(xì)胞標(biāo)志物有CD68,、CD80,、CD86,、CD32等,；常見M2巨噬細(xì)胞標(biāo)志物有CD206、CD204,、CD163等,。

M1和M2型常見鑒定marker

今天講解就到這了，大家如有細(xì)胞培養(yǎng)問(wèn)題,，歡迎交流哦,！

注：圖源網(wǎng)絡(luò)

本期小愛推薦

Absin產(chǎn)品線：
爆款產(chǎn)品：試劑盒(mIHC、IHC,、凋亡,、ELISA、ChIP,、Co-IP,、TR-FRET、生化檢測(cè),、殘留檢測(cè),、多因子檢測(cè))；細(xì)胞培養(yǎng)(類器官試劑盒+基質(zhì)膠,，胎牛血清+培養(yǎng)添加劑+細(xì)胞因子),、分化試劑盒；分子(mRNA合成服務(wù)+提取試劑盒),；化合物大包裝,；輔助試劑,、耗材/儀器、定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白/標(biāo)記/檢測(cè))...
特色產(chǎn)品：雞胚提取物CEE,、B27,、N2、霍亂毒素B亞單位CTB,、牛腦垂體提取物BPE,、百日咳毒素PTX、重組人胰島素Insulin,、人源低密度脂蛋白LDL...