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愛必信(上海)生物科技有...

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定制合成服務 | 愛必信,,讓mRNA合成不再難,!

閱讀:672      發(fā)布時間:2024-5-24
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背景介紹

 

核糖核酸(RNA)治療正成為現(xiàn)代醫(yī)學的一個新支柱,涵蓋了信使RNA(mRNA),、小干擾RNA(siRNA)和微小RNA(miRNA),。近年來,這一領域取得了迅猛發(fā)展,,其中基于mRNA制備的新guan疫苗在抗擊引起嚴重急性呼吸道綜合癥的新型guan狀病毒方面扮演了關鍵角色,。該疫苗以其超快的序列設計速度和易于大規(guī)模生產(chǎn)的特點,,為應對緊急和不斷變化的醫(yī)療危機提供可能。mRNA療法除了應用于傳染病,、腫瘤疫苗開發(fā)方向,,同時還在蛋白質替代療法、細胞治療,、基因編輯,、再生醫(yī)學等方向嶄露頭角。

 

服務介紹

 

上海愛必信生物科技有限公司是國內(nèi)優(yōu)先的mRNA藥物合成技術解決方案平臺,。公司專注于為mRNA藥物(疫苗)的開發(fā)提供全周期解決方案,,包括線性和環(huán)狀mRNA序列設計及篩選、合成工藝優(yōu)化以及生產(chǎn)質量控制等各個環(huán)節(jié),。

 

Absin mRNA合成優(yōu)勢:

? 專業(yè)支持mRNA定制合成服務,;

? 提供成品mRNA和mRNA合成原料;

? 針對不同客戶提供專項技術方案,;

? mRNA合成技術科學家竭誠為您服務,。

 

mRNA技術主要包括線性mRNA、自復制型mRNA,、環(huán)狀mRNA,,是一種將人工合成的mRNA分子引入細胞內(nèi),并利用細胞自身的翻譯機制將其翻譯為形成蛋白質的技術,。其合成過程大概分為三步:第一步根據(jù)目的基因序列設計mRNA序列,,優(yōu)化其序列并制備重組質粒;第二步對重組質粒進行線性化及加尾,;第三步對線性化質粒DNA進行體外轉錄,、加帽及純化,合成后的mRNA適用于細胞轉染,、微注射,、體外翻譯和mRNA疫苗等應用。

 

圖 mRNA制備流程

 

在此過程中為了讓mRNA能最終有效地在體外翻譯,,需要在體外轉錄合成mRNA時,,摻入5’端的m7G加帽結構和3’端的多聚腺苷酸[poly(A)尾]結構。同時N1-甲基假尿苷(N1-Methyl-Pseudo-UTP),、假尿苷(Pseudo/ψ-UTP)和其他修飾堿基的使用,,可以降低mRNA的免疫原性和提高其穩(wěn)定性。

 

LNP是目前臨床上很先進的非病毒基因輸送系統(tǒng),,其通常包含四種脂質成分:首先是在特定環(huán)境下產(chǎn)生正電荷的可電離脂質,,能與帶有負電荷的mRNA緊密結合;其次是一類聚乙二醇化的脂質,,負責穩(wěn)定納米顆粒的結構,;最后兩種分別是磷脂和膽固醇分子,負責填充納米顆粒的結構,。這四種簡單的成分將mRNA包裹起來,,避免它們降解,并送到細胞內(nèi),。

 

圖 LNP-mRNA制備流程

 

關于mRNA合成推薦的方案如下:

 

圖 Absin mRNA合成產(chǎn)品矩陣

 

1,、mRNA定制化合成

 

按照客戶序列信息定制合成1條mRNA,包括對mRNA進行AbsCapTM共轉錄加帽,、Poly A加尾以及任何客戶需求包括熒光修飾在內(nèi)的修飾核苷酸處理,,承諾所有制備材料的使用均可以實現(xiàn)zhi定。

 

圖 mRNA定制化合成流程

 

服務參數(shù):

1) 標準加帽:化學共轉錄法,,AbsCapTMAG

2) 標準修飾堿基:N1-methyl-Pseudouridine-5'-Triphosphate

3) 標準UTR,;AbsUtrTMCBT

4) 標準Poly(A):A100

5) zui低合成量:200μg/條

6) 標準質控:濃度檢測,,純度膠圖

7) 可選實驗:細胞表達驗證、LNP包裹

8) 標準定制化合成周期:2-4周

 

2,、mRNA定制化服務:

按照客戶給出的序列定制合成3條mRNA,保證可交付1條在細胞內(nèi)表達的目標mRNA,。本服務優(yōu)勢在于結合愛必信大量項目的篩選經(jīng)驗,,可為客戶快速篩選出可表達的mRNA序列,用于進行藥效測試的快速概念驗證,。

 

圖 mRNA定制化服務流程圖

 

服務參數(shù):

1) 標準加帽:化學共轉錄法,,AbsCapTMAG

2) 標準修飾堿基:N1-methyl-Pseudouridine-5'-Triphosphate

3) 標準UTR:AbsUtrTMCBT

4) 標準Poly(A):A100

5) zui低合成量:200μg/條

6) 標準質控:濃度檢測,純度膠圖

7) 可選實驗:LNP 包裹

8) 標準定制化服務周期:4-8周

 

3,、優(yōu)化篩選方案

mRNA因其理化性質,,在體內(nèi)進行表達時通常不穩(wěn)定,因此需要對mRNA進行改造和優(yōu)化,。線性mRNA一般需要經(jīng)由篩選,、生產(chǎn)、質控,,最后再與脂質體包裹形成最終產(chǎn)物,,開展進一步的臨床實驗。一般篩選項目包含密碼子優(yōu)化,、組件篩選和Peptide篩選,。

 

1) 密碼子優(yōu)化

基于多年的專業(yè)背景和豐富的設計經(jīng)驗,我司開發(fā)出了序列設計方案,,該序列設計方案結合了多種不同的算法和人工經(jīng)驗進行序列的綜合評定,,能夠盡量壓縮客戶所需篩選的序列數(shù)量,并提供穩(wěn)定,、高效的設計輸出,。

 

2) 組件篩選

組件包括UTR,、Poly A以及修飾堿基,客戶可以選擇對這些組件進行優(yōu)化,,以便在循環(huán)優(yōu)化推進中能夠獲得穩(wěn)定性高,、翻譯效率強以及免疫原性低的mRNA。

 

3) Peptide篩選

信號肽的篩選,,特別是對有分泌要求的靶點來說至關重要,。我司已經(jīng)建立了完備的信號肽庫,成熟的篩選方案可協(xié)助客戶設計高效,、穩(wěn)定的候選mRNA,,加快推進研發(fā)進度。

 

mRNA合成案例展示

 

定制化合成mRNA

 

圖 mRNA電泳質控圖譜

 

定制化服務,,表達1條線性mRNA

 

圖 線性mRNA表達案例

 

定制化服務,,表達1條環(huán)狀mRNA

 

圖 環(huán)狀mRNA表達案例

 

圖 PCC級別mRNA CDS序列設計和分子篩選案例

 

除了mRNA定制合成服務外,愛必信還提供成品工具mRNA和mRNA合成原料產(chǎn)品,。

 


分類

貨號

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

工具mRNA

abs60174

Cas9 mRNA

100ug

abs60176

EGFP mRNA

100ug

abs60178

Fluc mRNA

100ug

abs60180

mcherry mRNA

100ug

abs60191

Cre mRNA

100ug

abs60194

EPO mRNA

100ug

abs60332

Endless  eGFP mRNA

100ug

abs60333

Endless  Fluc  mRNA

100ug

abs60334

Endless  mcherry mRNA

100ug

abs60335

Endless  Cas 9 mRNA

100ug

abs60336

Endless  EPO mRNA

100ug

合成帽結構

abs60182

Abs Cap AG

10uL

abs60183

Abs Cap GG

10uL

abs60184

Abs Cap AU

10uL

核苷酸原料

abs60158

NTP鈉鹽混合溶液(含ATP,、CTP、GTP,、UTP)

1mL×3

修飾堿基

abs60155

假尿苷三磷酸四鈉鹽溶液

10uL

abs60156

N1-甲基-假尿苷三磷酸四鈉鹽溶液

10uL

abs60187

N6-甲基-ATP鋰鹽溶液

10uL

abs60152

牛痘病毒加帽酶

500U

abs60153

T7 RNA聚合酶

50KU

abs60166

2氧甲基轉移酶

2500U

abs60539

脫氧核糖核酸酶Ⅰ

1KU




 

Absin產(chǎn)品線:
爆款產(chǎn)品:試劑盒(mIHC,、IHC、凋亡,、ELISA,、ChIP、Co-IP,、TR-FRET,、生化檢測、殘留檢測,、多因子檢測),;細胞培養(yǎng)(類器官試劑盒+基質膠,胎牛血清+培養(yǎng)添加劑+細胞因子),、分化試劑盒,;分子(mRNA合成服務+提取試劑盒);化合物大包裝,;輔助試劑,、耗材/儀器、定制服務(抗體/多肽/蛋白/標記/檢測)...
特色產(chǎn)品:雞胚提取物CEE,、B27,、N2、霍亂毒素B亞單位CTB,、牛腦垂體提取物BPE,、百日咳毒素PTX,、重組人胰島素Insulin、人源低密度脂蛋白LDL...

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