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背景介紹：

疫情mRNA疫苗的成功開發(fā)使得mRNA技術(shù)得到重要的關(guān)注。mRNA技術(shù)作為一種通用性技術(shù),，其研發(fā)路徑和生產(chǎn)工藝顯著區(qū)別于傳統(tǒng)的生物醫(yī)藥研發(fā)模式,，有望在傳染病疫苗、腫瘤疫苗,、免疫治療,、蛋白替代療法、治療性抗體等多個領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用,，是醫(yī)藥研發(fā)進(jìn)入新紀(jì)元,。

在對于核酸藥物遞送系統(tǒng)研究、蛋白表達(dá)的療效研究以及mRNA藥物研發(fā)中工具mRNA起到非常重要作用,，那么大家知道什么是工具mRNA,，它的作用是什么呢？

什么是工具mRNA,？

工具mRNA（mRNA標(biāo)準(zhǔn)品）即成品的標(biāo)準(zhǔn)型信使核糖核酸（類似于大家分子實驗中常用的成品質(zhì)粒）,。用戶購買后無需對mRNA標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行任何處理，可直接應(yīng)用于相應(yīng)實驗,。

愛必信擁有一系列的線性,、環(huán)狀工具mRNA。其中線性mRNA采用化化學(xué)合成的Cap1帽結(jié)構(gòu),，使線性mRNA具有高比例的天然帽子結(jié)構(gòu),，修飾堿基 (N1-Methylpseudo-UTP、Pseudo-UTP,、5-Methoxy-UTP,、5-Methyl-CTP、N6-Methyl-ATP) 有5種可供選擇,，同時使用優(yōu)化了適用于哺乳動物細(xì)胞的密碼子,、UTR,、polyA結(jié)構(gòu)。環(huán)狀mRNA通過體外轉(zhuǎn)錄生成并環(huán)化,，繼而分離純化得到成品,。

工具mRNA分類：

1、報告基因類

報告基因類mRNA常用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染,、翻譯效率,、藥物遞送、體內(nèi)成像等研究,。其中愛必信EGFP mRNA是一種常用的示蹤蛋白mRNA,，熒光穩(wěn)定性強(qiáng)，用于表達(dá)加強(qiáng)的綠色熒光蛋白（分離自水母）,，發(fā)射波長為509nm,，可通過熒光顯微鏡或者流式細(xì)胞術(shù)檢測，是觀察mRNA遞送,、翻譯的理想工具,。

圖 EGFP mRNA Agarose電泳條帶

圖 HEK293細(xì)胞轉(zhuǎn)染EGFP mRNA 24h后表達(dá)效果

愛必信還擁有其他報告基因類工具mRNA如tdTomato mRNA、YFP mRNA,、mBanana mRNA等熒光蛋白mRNA,，可用于對照驗證實驗，大家如有需要?dú)g迎來詢,。

2,、基因編輯類

CRISPR/Cas9是*基因編輯系統(tǒng)，被廣泛用于治療各類疾病,。Cas9 mRNA可在細(xì)胞內(nèi)瞬時表達(dá)Cas9蛋白,，能減少免疫反應(yīng)和脫靶風(fēng)險。

3,、免疫抗原類

免疫抗原類mRNA是腫瘤免疫療法的理想研究工具,。卵白蛋白 (OVA) 是絲狀蛋白超家族的一員，是在蛋清中發(fā)現(xiàn)的主要糖蛋白,。是一種常用的免疫和生化研究抗原,，是一種已建立的氣道高反應(yīng)性模型過敏原，可激活細(xì)胞免疫和體液免疫,。

4,、蛋白替代類

EPO mRNA用于表達(dá)人源EPO蛋白 (human erythropoietin) 。我們使用 (Abs CapTM) 在體外轉(zhuǎn)錄生產(chǎn)了EPO mRNA,，化學(xué)合成的Cap1結(jié)構(gòu)使其具有高比例的天然的mRNA帽子結(jié)構(gòu),，從而獲得高效的表達(dá)效果。

工具mRNA產(chǎn)品特征：

工具mRNA產(chǎn)品優(yōu)勢：

1,、Cap1型帽結(jié)構(gòu),，提高mRNA穩(wěn)定性及翻譯效率,，更適合哺乳動物,；
2、5種修飾可供選擇,，加入修飾堿基可提高翻譯效率,，降低免疫原性；
3,、合適的PolyA尾結(jié)構(gòu),，保證mRNA穩(wěn)定性和翻譯效率；
4,、完整性高,，質(zhì)控嚴(yán)格，方便研究和應(yīng)用,。

用戶實驗案例1：

用核酸轉(zhuǎn)染試劑盒(abs60259)轉(zhuǎn)染mCherry mRNA至HEK293細(xì)胞24h,、48h，在熒光顯微鏡下觀察到的紅色熒光穩(wěn)定且信號強(qiáng),。（具體實驗操作可參考核酸轉(zhuǎn)染試劑盒(abs60259)實驗操作步驟）

圖 轉(zhuǎn)染mCherry mRNA 24h后的熒光

圖 轉(zhuǎn)染mCherry mRNA 48h后的熒光

用戶實驗案例2

用mRNA轉(zhuǎn)染試劑(abs60339)在不同類型細(xì)胞中轉(zhuǎn)染線性工具mRNA—EGFP mRNA,，處理細(xì)胞24h后利用熒光顯微鏡拍照，各種細(xì)胞都呈現(xiàn)較強(qiáng)的綠色熒光,。

圖 轉(zhuǎn)染EGFP mRNA于不同類型細(xì)胞中

用戶實驗案例3

注射線性Luciferase mRNA至活體小鼠體內(nèi),，小鼠體重150ug，每針注射20uL,，共計3針,，3天后進(jìn)行活體成像。

圖 Luciferase mRNA注射小鼠后活體成像

FAQ：

1,、工具mRNA保存條件是什么,？

A：需要低于-40°C保存，-80℃冰箱或液氮保存都可以,，愛必信所提供的均為新鮮生產(chǎn)的產(chǎn)品,，為了達(dá)到最佳使用效果，請在收到貨物的2個月內(nèi)使用,。若不小心將mRNA短期（例如1天）存放于-20℃,，可以在正式實驗之前將mRNA跑瓊脂糖凝膠電泳看其是否降解。

2,、工具mRNA是什么狀態(tài),？

A：我司的工具mRNA是液體狀態(tài),，通用溶劑一般是1mM檸檬酸鈉鹽溶液，pH為6.4,。

3,、工具mRNA的貨期有多久？

A：我公司工具mRNA均為新鮮生產(chǎn)產(chǎn)品,，我們收到訂單后會立即安排生產(chǎn),、發(fā)貨。一般貨期為1-2周,。

4,、工具mRNA的純度能達(dá)到多少？

A：線性mRNA可達(dá)到90%的純度,；環(huán)狀mRNA如果長度是3-5k,，可達(dá)到科研級別純度，通常能達(dá)到85%的純度,。環(huán)狀mRNA序列越長,，關(guān)環(huán)效率越低，純化難度越高,。

5,、工具mRNA推薦的帽結(jié)構(gòu)是哪一種？

A：Cap1 AG,。加帽率高達(dá)95%,。

6、我所需要的工具mRNA在沒有找到,，怎么辦,？

A：目前市面上常規(guī)的mRNA標(biāo)注品類目我公司都是有的。若我司的工具mRNA類別中沒有您所需的mRNA,，您可以選擇我公司的定制合成服務(wù),，我們?yōu)槟O(shè)計合成特定的mRNA。

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WB相關(guān)：ECL發(fā)光液,、預(yù)染marker、預(yù)制膠,；IHC相關(guān)：二抗試劑盒,、組化筆；IP/CoIP試劑盒,；激動劑/抑制劑,；血清、BSA,、蛋白酶K,、CTB,、TTX、CEE,；凋亡試劑盒,；呼吸爆發(fā)試劑盒；ELISA試劑盒,；重組蛋白,；抗體: 二抗、標(biāo)簽抗體,、對照抗體,；定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白/標(biāo)記/檢測)...