背景介紹:
疫情mRNA疫苗的成功開(kāi)發(fā)使得mRNA技術(shù)得到重要的關(guān)注,。mRNA技術(shù)作為一種通用性技術(shù),其研發(fā)路徑和生產(chǎn)工藝顯著區(qū)別于傳統(tǒng)的生物醫(yī)藥研發(fā)模式,,有望在傳染病疫苗,、腫瘤疫苗、免疫治療、蛋白替代療法,、治療性抗體等多個(gè)領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用,,是醫(yī)藥研發(fā)進(jìn)入新紀(jì)元。
在對(duì)于核酸藥物遞送系統(tǒng)研究,、蛋白表達(dá)的療效研究以及mRNA藥物研發(fā)中工具mRNA起到非常重要作用,,那么大家知道什么是工具mRNA,它的作用是什么呢,?
什么是工具mRNA,?
工具mRNA(mRNA標(biāo)準(zhǔn)品)即成品的標(biāo)準(zhǔn)型信使核糖核酸(類似于大家分子實(shí)驗(yàn)中常用的成品質(zhì)粒)。用戶購(gòu)買后無(wú)需對(duì)mRNA標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行任何處理,,可直接應(yīng)用于相應(yīng)實(shí)驗(yàn)。
愛(ài)必信擁有一系列的線性,、環(huán)狀工具mRNA,。其中線性mRNA采用化化學(xué)合成的Cap1帽結(jié)構(gòu),使線性mRNA具有高比例的天然帽子結(jié)構(gòu),,修飾堿基 (N1-Methylpseudo-UTP,、Pseudo-UTP、5-Methoxy-UTP,、5-Methyl-CTP,、N6-Methyl-ATP) 有5種可供選擇,同時(shí)使用優(yōu)化了適用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的密碼子,、UTR,、polyA結(jié)構(gòu)。環(huán)狀mRNA通過(guò)體外轉(zhuǎn)錄生成并環(huán)化,,繼而分離純化得到成品,。
工具mRNA分類:
1、報(bào)告基因類
報(bào)告基因類mRNA常用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染,、翻譯效率,、藥物遞送、體內(nèi)成像等研究,。其中愛(ài)必信EGFP mRNA是一種常用的示蹤蛋白mRNA,,熒光穩(wěn)定性強(qiáng),用于表達(dá)加強(qiáng)的綠色熒光蛋白(分離自水母),,發(fā)射波長(zhǎng)為509nm,,可通過(guò)熒光顯微鏡或者流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè),是觀察mRNA遞送,、翻譯的理想工具,。
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
abs60176 | EGFP mRNA | 100ug |
abs60178 | Fluc mRNA | 100ug |
abs60180 | mcherry mRNA | 100ug |
abs60192 | EBFP mRNA | 100ug |
abs60332 | Endless eGFP mRNA | 100ug |
abs60333 | Endless Fluc mRNA | 100ug |
abs60334 | Endless mcherry mRNA | 100ug |
圖 EGFP mRNA Agarose電泳條帶
圖 HEK293細(xì)胞轉(zhuǎn)染EGFP mRNA 24h后表達(dá)效果
愛(ài)必信還擁有其他報(bào)告基因類工具mRNA如tdTomato mRNA、YFP mRNA、mBanana mRNA等熒光蛋白mRNA,,可用于對(duì)照驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),,大家如有需要?dú)g迎來(lái)詢。
2,、基因編輯類
CRISPR/Cas9是*基因編輯系統(tǒng),,被廣泛用于治療各類疾病。Cas9 mRNA可在細(xì)胞內(nèi)瞬時(shí)表達(dá)Cas9蛋白,,能減少免疫反應(yīng)和脫靶風(fēng)險(xiǎn),。
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
abs60174 | Cas9 mRNA | 100ug |
abs60191 | Cre mRNA | 100ug |
abs60335 | Endless Cas 9 mRNA | 100ug |
3、免疫抗原類
免疫抗原類mRNA是腫瘤免疫療法的理想研究工具,。卵白蛋白 (OVA) 是絲狀蛋白超家族的一員,,是在蛋清中發(fā)現(xiàn)的主要糖蛋白。是一種常用的免疫和生化研究抗原,,是一種已建立的氣道高反應(yīng)性模型過(guò)敏原,,可激活細(xì)胞免疫和體液免疫。
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
abs60312 | OVA mRNA | 100ug |
4,、蛋白替代類
EPO mRNA用于表達(dá)人源EPO蛋白 (human erythropoietin) ,。我們使用 (Abs CapTM) 在體外轉(zhuǎn)錄生產(chǎn)了EPO mRNA,化學(xué)合成的Cap1結(jié)構(gòu)使其具有高比例的天然的mRNA帽子結(jié)構(gòu),,從而獲得高效的表達(dá)效果,。
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
abs60194 | EPO mRNA | 100ug |
abs60336 | Endless EPO mRNA | 100ug |
工具mRNA產(chǎn)品特征:
濃度 | 1mg/mL |
狀態(tài) | 溶劑,1mM Sodium Citrate,,pH 6.4 |
儲(chǔ)存溫度 | 建議分裝,,低于-40℃保存,避免反復(fù)凍融 |
效期 | 建議在2個(gè)月內(nèi)使用完 |
工具mRNA產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):
1,、Cap1型帽結(jié)構(gòu),,提高mRNA穩(wěn)定性及翻譯效率,更適合哺乳動(dòng)物,;
2,、5種修飾可供選擇,加入修飾堿基可提高翻譯效率,,降低免疫原性,;
3、合適的PolyA尾結(jié)構(gòu),,保證mRNA穩(wěn)定性和翻譯效率,;
4、完整性高,,質(zhì)控嚴(yán)格,,方便研究和應(yīng)用,。
用戶實(shí)驗(yàn)案例1:
用核酸轉(zhuǎn)染試劑盒(abs60259)轉(zhuǎn)染mCherry mRNA至HEK293細(xì)胞24h、48h,,在熒光顯微鏡下觀察到的紅色熒光穩(wěn)定且信號(hào)強(qiáng),。(具體實(shí)驗(yàn)操作可參考核酸轉(zhuǎn)染試劑盒(abs60259)實(shí)驗(yàn)操作步驟)
圖 轉(zhuǎn)染mCherry mRNA 24h后的熒光
圖 轉(zhuǎn)染mCherry mRNA 48h后的熒光
用戶實(shí)驗(yàn)案例2
用mRNA轉(zhuǎn)染試劑(abs60339)在不同類型細(xì)胞中轉(zhuǎn)染線性工具mRNA—EGFP mRNA,處理細(xì)胞24h后利用熒光顯微鏡拍照,,各種細(xì)胞都呈現(xiàn)較強(qiáng)的綠色熒光,。
圖 轉(zhuǎn)染EGFP mRNA于不同類型細(xì)胞中
用戶實(shí)驗(yàn)案例3
注射線性Luciferase mRNA至活體小鼠體內(nèi),小鼠體重150ug,,每針注射20uL,,共計(jì)3針,3天后進(jìn)行活體成像,。
圖 Luciferase mRNA注射小鼠后活體成像
FAQ:
1,、工具mRNA保存條件是什么?
A:需要低于-40°C保存,,-80℃冰箱或液氮保存都可以,,愛(ài)必信所提供的均為新鮮生產(chǎn)的產(chǎn)品,為了達(dá)到最佳使用效果,,請(qǐng)?jiān)谑盏截浳锏?個(gè)月內(nèi)使用。若不小心將mRNA短期(例如1天)存放于-20℃,,可以在正式實(shí)驗(yàn)之前將mRNA跑瓊脂糖凝膠電泳看其是否降解,。
2、工具mRNA是什么狀態(tài),?
A:我司的工具mRNA是液體狀態(tài),,通用溶劑一般是1mM檸檬酸鈉鹽溶液,pH為6.4,。
3,、工具mRNA的貨期有多久?
A:我公司工具mRNA均為新鮮生產(chǎn)產(chǎn)品,,我們收到訂單后會(huì)立即安排生產(chǎn),、發(fā)貨。一般貨期為1-2周,。
4,、工具mRNA的純度能達(dá)到多少?
A:線性mRNA可達(dá)到90%的純度,;環(huán)狀mRNA如果長(zhǎng)度是3-5k,,可達(dá)到科研級(jí)別純度,通常能達(dá)到85%的純度,。環(huán)狀mRNA序列越長(zhǎng),,關(guān)環(huán)效率越低,純化難度越高。
5,、工具mRNA推薦的帽結(jié)構(gòu)是哪一種,?
A:Cap1 AG。加帽率高達(dá)95%,。
6,、我所需要的工具mRNA在沒(méi)有找到,怎么辦,?
A:目前市面上常規(guī)的mRNA標(biāo)注品類目我公司都是有的,。若我司的工具mRNA類別中沒(méi)有您所需的mRNA,您可以選擇我公司的定制合成服務(wù),,我們?yōu)槟O(shè)計(jì)合成特定的mRNA,。
其他相關(guān)產(chǎn)品推薦
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
abs60259 | 核酸轉(zhuǎn)染試劑盒 | 1.5mL |
abs60339 | mRNA轉(zhuǎn)染試劑 | 1mL |
abs7119 | 1.5mL離心管(無(wú)菌無(wú)酶) | 10盒/箱 |
abs7075 | 200uL吸頭(盒裝,無(wú)菌無(wú)酶) | 100盒/箱 |
Absin特色產(chǎn)品線:
WB相關(guān):ECL發(fā)光液,、預(yù)染marker,、預(yù)制膠;IHC相關(guān):二抗試劑盒,、組化筆,;IP/CoIP試劑盒;激動(dòng)劑/抑制劑,;血清,、BSA、蛋白酶K,、CTB,、TTX、CEE,;凋亡試劑盒,;呼吸爆發(fā)試劑盒;ELISA試劑盒,;重組蛋白,;抗體: 二抗、標(biāo)簽抗體,、對(duì)照抗體,;定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白/標(biāo)記/檢測(cè))...
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