背景介紹:
銅濃度檢測在藥物發(fā)現(xiàn)和環(huán)境監(jiān)測中得到廣泛應用,。銅是人體必需的微量元素。銅蛋白酶在鐵和兒茶酚胺代謝,,在清除自由基,,血紅蛋白,彈性蛋白,,膠原等方面扮演著重要角色,。銅主要存在于肝臟中的銅藍蛋白中。銅含量過低會導致智力低下,、色素缺失、貧血,、肌肉緊張癥,、骨質(zhì)壞血病等疾病。
銅離子檢測在腫瘤研究中的應用:
歷史研究表明,,銅穩(wěn)態(tài)失調(diào)與多種腫瘤有關,,如婦科腫瘤、結直腸癌等,,而癌癥患者血清銅水平的升高與癌癥分級和化療耐藥性有關,,如果銅的濃度超過一定的閾值,就會中毒,,導致一種新細胞死亡形式,,稱為銅中毒,這種方式也被視為癌癥治療的潛在方法,。
2023年10月20日,,上海市第一人民醫(yī)院黃陳教授和范廣建教授團隊在Nature Communications雜志上發(fā)表了題為“Lactylation of METTL16 promotes cuproptosis via m6A-modification on FDX1 mRNA in gastric cancer"的研究論文。本研究揭示了METTL16調(diào)控胃癌細胞銅死亡的分子機制,,闡明乳?;揎椉癿6A修飾在胃癌進展中的重要意義,為胃癌的治療提供新的靶標和策略,。
圖 運用銅離子檢測試劑盒abs580140對48例胃癌患者的胃癌組織裂解物進行了銅含量檢測
銅離子檢測試劑盒:
試劑盒組分 | 規(guī)格 | 儲存條件 |
96-Well Microplate | 1 plate | 常溫 |
Assay Buffer | 30 mL x 4 | 4℃ |
Reaction Buffer | 4 mL x 1 | 4℃ |
Masking Reagent | Powder x 1 | 4℃ |
Dye Reagent | Powder x 1 | 4℃,,避光保存 |
Dye Reagent Diluent | 1 mL x 1 | 4℃ |
Standard (250 μmol/L) | 1 mL x 1 | 4℃ |
另需自備的材料:酶標儀(可讀取605nm處的吸光度)、蒸餾水,、移液器與槍頭,、離心機、計時器等,。
操作步驟(以組織樣本為例):
1,、樣本處理:稱取1g組織,,與1mL Assay buffer在冰上勻漿,10000g 4℃離心10min,,取上清液至新離心管中,,冰上保存待檢測。
2,、試劑準備:
標準品:用蒸餾水二倍連續(xù)稀釋標準品,;
圖 標準品二倍連續(xù)稀釋示例
Masking Reagent:使用1mL蒸餾水溶解(現(xiàn)配現(xiàn)用);
Dye Reagent:使用1mL Dye Reagent Diluent溶解Dye Reagent,,70℃加熱助溶(現(xiàn)配現(xiàn)用),。
3、上樣:分別將140uL不同濃度的標準品,、樣品加入相應孔中,,另設置空白孔加入140uL蒸餾水;每孔分別加入40uL Reaction Buffer,,10uL Masking Reagent以及10uL Dye Reagent,,混合均勻,室溫孵育15min,。
試劑 | 標準品孔 | 樣品孔 | 空白孔 |
標準品 | 140uL | -- | -- |
樣品 | -- | 140uL | -- |
蒸餾水 | -- | -- | 140uL |
Reaction Buffer | 40uL | 40uL | 40uL |
Masking Reagent | 10uL | 10uL | 10uL |
Dye Reagent | 10uL | 10uL | 10uL |
4,、檢測與計算:使用酶標儀測量605nm處的吸光度,擬合標準曲線并計算樣本濃度,。
圖 標曲示例
注意事項:
1)金屬螯合劑(如EDTA)會干擾此分析,,在樣品制備中應避免使用;
2)對于未知的樣品,,建議多做幾個稀釋梯度進行預實驗,,確保讀數(shù)在標準曲線范圍內(nèi);
3)試劑盒中的Dye Reagent需要現(xiàn)配現(xiàn)用,,配好的溶液無法儲存,,可能影響顯色讀數(shù)進而影響檢測;如果樣本需要分批檢測,,建議分批收樣儲存,,待樣本收齊后統(tǒng)一檢測;
4)每次實驗必須重新檢測并繪制標準曲線,。
Absin生化檢測試劑盒——離子檢測系列:
貨號 | 品名 | 用途 |
abs580105 | 鐵離子檢測試劑盒 | 鐵離子(Fe3+)含量檢測 |
abs580140 | 銅離子檢測試劑盒 | 銅離子(Cu2+)含量檢測 |
abs580188 | 硒離子檢測試劑盒 | 硒離子含量檢測 |
abs580103 | 鉀離子檢測試劑盒 | 鉀離子(K+)含量檢測 |
abs580104 | 鈣離子檢測試劑盒 | 鈣離子(Ca2+)含量檢測 |
abs580106 | 鎂離子檢測試劑盒 | 鎂離子(Mg2+)含量檢測 |
abs580107 | 磷離子檢測試劑盒 | 磷離子含量檢測 |
abs580108 | 鋅離子檢測試劑盒 | 鋅離子(Zn2+)含量檢測 |
abs580110 | 孔雀綠磷離子檢測試劑盒 | 孔雀綠磷離子含量檢測 |
abs580146 | 鉻離子檢測試劑盒 | 鉻(Cr)離子含量檢測 |
好消息,!Absin文獻獎勵重磅升級!
Absin特色產(chǎn)品線:
WB相關:ECL發(fā)光液,、預染marker,、預制膠;IHC相關:二抗試劑盒,、組化筆,;IP/CoIP試劑盒,;激動劑/抑制劑;血清,、BSA,、蛋白酶K、CTB,、TTX,、CEE;凋亡試劑盒,;呼吸爆發(fā)試劑盒,;ELISA試劑盒;重組蛋白,;抗體: 二抗,、標簽抗體、對照抗體,;定制服務(抗體/多肽/蛋白/標記/檢測)...
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