Q1：我想要進行多色實驗，對于我的樣本有什么要求嗎,？
A1：您按照免疫組化的標準對您的樣本進行前處理即可,。如果是從歷史切片或者蠟塊中挑選用來做多色，請盡量選取相對較新的樣本（一個月內(nèi)）,，最長不要選保存超過半年的樣本,，可能會有靶點缺失或者強非特異性，導致染色效果欠佳,。
附上石蠟切片樣本處理推薦：
1）取新鮮組織（理想的取材厚度是0.2cm~0.3cm）,，如取的組織過大，需要切小后再做固定,，以免組織太厚固定液滲透不良,，導致后續(xù)染色效果不佳,；
2）組織離體后（不要超過30分鐘）迅速轉(zhuǎn)移到固定液中（一般選用10%中性福爾馬林或4%多聚甲醛）,，在常溫條件下固定時間為18-24小時，不要固定太長時間,，容易導致組織抗原丟失,，影響陽性信號顯色；
3）浸蠟溫度應控制在58~60℃左右,，浸蠟用的石蠟應經(jīng)常更換,，以減少石蠟中二甲苯的含量。高溫下的二甲苯容易使組織發(fā)脆,，細胞收縮,，容易導致后續(xù)染色過程中組織脫片；
4）切片厚度最佳為4微米,，組織太厚容易導致染料滲透不加,，且多層細胞之間熒光發(fā)生串擾，影響成像觀察,。貼片需選用免疫組化專用的防脫載玻片,，不要在水浴撈片環(huán)節(jié)添加任何粘合劑，撈片后豎直置于吸水紙上去除水分,，輕敲去除水滴,，不要用紙擦拭玻片,；
5）切片在45℃~65℃烤箱中烤片30-60分鐘左右，到干片為止,，否則后續(xù)染色過程中易脫片,。但需要注意溫度過高或時間過長均會影響抗原的活性，因為在高溫干燥條件下會加速組織切片中抗原的氧化,。
Q2：如果我的樣本是冰凍切片或者細胞爬片,，可以用來做多色實驗嗎？
A2：可以的,，多色實驗本身不局限您的樣本類型,，但需要注意的是您的切片或者爬片能否經(jīng)得起多輪抗體洗脫，在樣本不脫片的情況下,，才能有一個比較好的染色效果,。如果您是這類樣本，您需要額外準備一瓶抗體洗脫液（abs994）,，替代多色實驗中的熱修復步驟,，采用溫和的洗脫方式，避免高溫高壓破壞切片,。需要注意的是,，您依舊需要控制切片厚度，盡量保證在單層細胞的厚度,，如太厚,，多層細胞之間發(fā)生重疊，熒光信號會發(fā)生串擾,。（PS：石蠟切片是比較適合做多色實驗的樣本類型?。?br/>
Q3：我該如何選擇用于做多色的抗體呢？
A3：多色這項技術比較突出的一個優(yōu)勢就在于對一抗種屬沒有特殊的限定,，根據(jù)樣本種屬選擇即可,，我們試劑盒本身配備了二抗（鼠兔通用二抗或者抗兔二抗），您在選取一抗來源的時候,，盡可能選擇兔子或者小鼠來源的一抗,，如確實找不到鼠或兔來源的一抗也沒有關系，您只需要再準備一個跟該一抗來源適配的能用于免疫組化的HRP二抗即可,。另外,，您的一抗需要能應用于IHC，并且盡量選擇單克隆抗體,，多抗往往容易產(chǎn)生非特異性,。
Q4：我注意到你們多色試劑盒中也是熒光染料，我在操作過程中需要額外避光嗎,？
A4：不用的,，您在常規(guī)日光燈環(huán)境下操作就可以,，我們?nèi)玖系臒晒鈴姸群芨撸粫敲慈菀状銣?，但涉及到需要孵育或者保存的時候還是建議您采用避光濕盒進行,。
Q5：我今天做好了多色片子，但無法立即進行掃描觀察,，我該怎么保存呢,？
A5：染好的多色片子可以避光在4℃條件下保存較長的時間，但我們建議您完成染色以后,，在兩周內(nèi)完成成像,，并且如果需要長時間保存，建議您用透明指甲油對蓋玻片邊緣進行密封,。如保存時間過長,，或保存不當，封片劑容易干掉,，此時再成像會有較強非特異性,，可以使用PBS把蓋玻片洗下來，重新封片以后再觀察,，但成像效果依舊會打折扣,，還是建議您盡快完成成像。（PS：雖然熒光染料沒有那么容易淬滅,，但若多次成像反復激發(fā),，依舊會淬滅，2-3次影響不會很大,，但不排除偶然性哦）
Q6：整個多色實驗一般需要多久能夠完成呀,？一天能行嗎？
A6：如果您的指標比較少（2~3個指標）,，恰好您又是“肝帝"愿意熬夜做實驗，那么一天是可以做完的哦,，因為我們多色染料有信號放大的功能,，且試劑盒搭配的二抗是多聚的HRP二抗，也能放大信號,，因此原本需要4℃過夜的一抗孵育,，可以在室溫1小時，或者37℃烘箱一小時完成,，滿打滿算一天是可以做完實驗的,。但如果您不想要這么“肝"，當然可以,，您只需要在一抗孵育的步驟選擇4℃過夜,，第二天再來繼續(xù)做二抗孵育等后續(xù)操作就行,，跟您做IHC實驗一樣，當您指標比較多的時候,，可以合理安排,，部分抗體室溫1小時，部分抗體4℃過夜,，但也不可把“戰(zhàn)線"拉得太長,，控制在盡可能短的時間完成實驗，畢竟遲則生變哦,。
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| abs50012 | 四色多重熒光免疫組化染色試劑盒（鼠兔二抗） | 20T/100T | 現(xiàn)貨 |
| abs50028 | 四色多重熒光免疫組化染色試劑盒（兔二抗） | 20T/100T | 現(xiàn)貨 |
| abs50013 | 五色多重熒光免疫組化染色試劑盒（鼠兔二抗） | 20T/100T | 現(xiàn)貨 |
| abs50029 | 五色多重熒光免疫組化染色試劑盒（兔二抗） | 20T/100T | 現(xiàn)貨 |
| abs50014 | 六色多重熒光免疫組化染色試劑盒（鼠兔二抗） | 20T/100T | 現(xiàn)貨 |
| abs50030 | 六色多重熒光免疫組化染色試劑盒（兔二抗） | 20T/100T | 現(xiàn)貨 |
| abs50015 | 七色多重熒光免疫組化染色試劑盒（鼠兔二抗） | 20T/100T | 現(xiàn)貨 |
| abs50031 | 七色多重熒光免疫組化染色試劑盒（兔二抗） | 20T/100T | 現(xiàn)貨 |
| abs50037 | 七色多重熒光免疫組化染色試劑盒（plus）（鼠兔通用二抗） | 20T/100T | 現(xiàn)貨 |
| abs50038 | 七色多重熒光免疫組化染色試劑盒（plus）（抗兔二抗） | 20T/100T | 現(xiàn)貨 |
| abs994 | 抗體洗脫液（mIHC專用） | 30ml | 現(xiàn)貨 |
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Absin精選抗體庫,，自由組合panel!
| 人 | 小鼠 |
| T細胞：CD3、CD4,、CD8,、FOXP3、CD45,、CD103 | T細胞：CD3,、CD4、CD8,、FOXP3,、CD45 |
| 巨噬細胞：CD68、CD163,、CD206,、CD86 | 中性粒細胞、B細胞：LY6G,、CD11c,、CD20、CD19 |
| 免疫檢查點：PD-1、PD-L1,、HLA-DR,、TIM-3、GZMB,、CD24,、LAG-3 | 巨噬細胞：F4/80、CD68,、CD86,、CD11b、CD163,、M-CSF |
| 成纖維細胞：α-SMA | 腫瘤相關：SHP-2 |
| 腫瘤相關：Ki-67,、PANCK、VEGF | 白介素：IL-4,、IL-10,、IL-13 |
| NK細胞：CD56 | 免疫檢查點：GZMB、PD-1,、PD-L1 |
| B細胞：CD20,、CD19 | NK細胞：NKR-P1C（NK1.1） |
| 中性粒細胞：CD11c | 信號通路相關：Arrestin-C、iNOS |
Absin特色產(chǎn)品線：
WB相關：ECL發(fā)光液,、預染marker,、預制膠；IHC相關：二抗試劑盒,、組化筆,；IP/CoIP試劑盒；激動劑/抑制劑,；血清,、BSA、蛋白酶K,、CTB,、TTX、CEE,；凋亡試劑盒,；呼吸爆發(fā)試劑盒；ELISA試劑盒,；重組蛋白；抗體: 二抗,、標簽抗體,、對照抗體；定制服務(抗體/多肽/蛋白/標記/檢測)...
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