MultiNuclease全能核酸酶,,又稱廣譜核酸酶,是一種來(lái)源于Serratia Marcescens的非限制性核酸內(nèi)切酶,。它能夠在非常廣泛的條件下(6 M urea,,0.1 M Guanidine HCl,0.4% Triton X100,,0.1% SDS,1 mM EDTA,,1 mM PMSF)降解所有形式的(雙鏈,、單鏈、線狀,、環(huán)狀或超螺旋形式)DNA和RNA,,生成含有5’-磷酸末端的3-5個(gè)寡核苷酸殘基片段,廣泛用于去除生物制品中的核酸。
產(chǎn)品介紹:
本品經(jīng)基因工程改造在Escherichia coli (E. coli)中表達(dá)純化,,不僅可在科學(xué)研究中降低細(xì)胞上清和細(xì)胞裂解液的粘度,,提高蛋白純化效率及功能研究;還可以應(yīng)用在病毒純化,、疫苗生產(chǎn),、蛋白和多糖類制藥工業(yè)作為宿主殘留核酸去除試劑,將宿主殘留核酸降至皮克(pg)級(jí)別從而提高生物制品功效和安全性,;并且可以有效防止細(xì)胞治療和疫苗研究中人外周血單核細(xì)胞(PBMC)的結(jié)團(tuán),。
該酶與 BacReady-Protein Extraction Solution 和 RIPA LysisBuffer 等蛋白抽提試劑配合使用,從而消除粗提物中的核酸,,降低粘度,。
純度:≥95%
內(nèi)毒素含量:< 0.25EU/1500U
比活:≥1.1*106U/mg
使用方法
1、樣本準(zhǔn)備:
貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)基,,用 PBS 清洗細(xì)胞,,去除上清。
懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,,用 PBS 清洗細(xì)胞,,6,000 rpm 離心 10 min,收集沉淀,。
大腸桿菌:離心收集菌體,,用 PBS 清洗 1 次,8,000 rpm 離心 5 min,,收集沉淀,。
2、樣品處理:
將收集到的細(xì)胞沉淀按照質(zhì)量(g)與體積(mL)比 1:(10~20) 的比例進(jìn)行裂解處理,,也可通過(guò)在冰上或室溫通過(guò)機(jī)械或化學(xué)方法裂解細(xì)胞(1 g 細(xì)胞約為 109 個(gè)),。
3、酶的添加:
按照 250 Units 消化 1 g 細(xì)胞沉淀的比例添加,,也可以跟據(jù)上表中的推薦使用量自行選定添加方案,,在一定范圍內(nèi)增加酶量,消化所需時(shí)間相應(yīng)減少,。
4,、上清獲取:
以 12,000 rpm 的轉(zhuǎn)速離心 30min 獲得細(xì)胞裂解液上清,,再進(jìn)行后續(xù)相關(guān)實(shí)驗(yàn),。
【注】若溶液為高鹽溶液,偏酸性或者偏堿性,,含有較高濃度的去垢劑,、變性劑,,應(yīng)適當(dāng)增加酶的用量或延長(zhǎng)孵育時(shí)間。
產(chǎn)品信息
貨號(hào) | 名稱 | 規(guī)格 |
abs60157 | 全能核酸酶 | 10KU/10KU*5/250KU/500KU |
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