日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

　　淋巴細(xì)胞分離液是一種根據(jù)細(xì)胞密度差異,，借助離心產(chǎn)生的重力加速度,，進(jìn)行細(xì)胞的分離純化的常用試劑。常用的淋巴細(xì)胞分離液有Ficoll淋巴細(xì)胞分離液,、Percoll淋巴細(xì)胞分離液,。Ficoll與Percoll分離單個(gè)核細(xì)胞的方法均為密度梯度離心法。分離原理：外周血中單個(gè)核細(xì)胞和單核細(xì)胞,其體積,、形態(tài)和密度與其他細(xì)胞不同,，淋巴細(xì)胞分離液是一種密度介于1.075~1.090之間而近似于等滲的溶液,用它做密度梯度離心,使一定密度的細(xì)胞按相應(yīng)密度梯度分布，從而將各種血細(xì)胞加以分離,。

如何用淋巴細(xì)胞分離液分離外周血中的單個(gè)核細(xì)胞,？

　　1．抽取正常人靜脈血加到肝素抗凝管中，加等量含5～10IU/ml肝素的無血清緩沖液懸浮細(xì)胞,。將細(xì)胞懸液小心加在與血液等量的淋巴細(xì)胞分離液上,，室溫中，水平離心500×g20分鐘。此時(shí)離心管中形成5層：最上面是血漿,，血漿層和淋巴細(xì)胞分離液之間是PBMC,，淋巴細(xì)胞分離液層和最下面的紅細(xì)胞層之間是粒細(xì)胞層，又成為棕黃層,。

　　2．吸去最上層的血漿,，收集血漿層和淋巴細(xì)胞分離液交界面的單個(gè)核細(xì)胞，盡量全部吸出PBMC,。加1～2倍量含5IU/ml肝素,、2％滅活小牛血清的Hanks液（洗滌液），混勻后離心200×g10分鐘,，低速離心有利于去除細(xì)胞懸液中留存的血小板，去上清液,。

　　3．再用同樣洗滌液洗滌細(xì)胞2次,，每次離心500×g10分鐘，洗去殘留的淋巴細(xì)胞分離液,。用1％臺盼藍(lán)染色檢測細(xì)胞活力（應(yīng)>95％）并計(jì)數(shù)細(xì)胞,。再用含10％小牛血清的細(xì)胞培養(yǎng)液將細(xì)胞配成適當(dāng)濃度。通常,，每毫升外周血可得1×106～2×106PBMC,。