日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

您好, 歡迎來到化工儀器網

| 注冊| 產品展廳| 收藏該商鋪

15000105423

technology

首頁   >>   技術文章   >>   實驗室WB常見問題指南之Marker,,染色及內參等相關問題

愛必信(上海)生物科技有...

立即詢價

您提交后,專屬客服將第一時間為您服務

實驗室WB常見問題指南之Marker,,染色及內參等相關問題

閱讀:17562      發(fā)布時間:2018-4-24
分享:

Marker,染色及內參等相關問題

Q:用的是預染marker,,但是電泳總跑不全8條帶,,請問什么原因?怎樣改善,?膠用過8%,10%,,12%,,都是這樣。marker是新買的,。

A:一般來說,,是小分子量Marker跑走了,可以增加膠濃度或減少電泳時間,。梯度膠也是不錯的選擇,。(梯度凝膠愛必信就可提供呦)

Q:Western Blot哪種染色好?

A:(1)陰離子染料是zui常用的,,特別是氨基黑,,脫色快,背景低檢測極限可達到1.5μg,,考馬雖然與氨基黑有相同的靈敏度,,但脫色慢,背景高,。麗春紅S 和快綠在檢測后容易從蛋白質中除去 ,,以便進行隨后的氨基酸分析,。缺點是:溶劑系統的甲醇會引起硝化纖維素膜的 皺縮或破壞。不能用于正電荷的膜,。靈敏度低,。

   (2)膠體金,靈敏度高,,檢測范圍可到pg級,,但染色比穩(wěn)定。

   (3)生物素化靈敏度位于1,、2之間,,可用于任何一種膜。

Q:是否Western Blot實驗半定量一定要加ACTIN內參,?

A:對于發(fā)表文章的實驗一定要加內參,,實驗嚴謹。

Q用BANDSCAN分析結果行嗎,?

A:分析一般的結果沒問題,。

Q: 核內抗原Western Blot內參選擇什么合適?

A:可以選用組蛋白,,組蛋白在細胞核中的表達是很穩(wěn)定的,,有很多都可以當成內參,在網上查查就可以選出你要的內參,。

Q轉膜時采用電流是否比電壓準確,,是否根據0.8mA/cm2,一般1小時左右,?

A:不是的,, 半干法推薦用恒流,一般根據目的蛋白的大小來確定電流和時間,,一般蛋白越大,,轉膜所需時間就越長。

Q:封閉,,一抗,,二抗時的溫度有沒有什么規(guī)定呢,比如現在我就在室溫里做,,或者要在4度下?

A:均可在室溫進行,,如果時間不夠,一抗孵育可以先在室溫進行一個小時,,然后4度過夜,。

Q: PVDF膜和硝酸膜結合蛋白的原理是什么?

A:一般而言,,硝酸纖維素膜是通過疏水作用來和蛋白質相聯,,這樣的話,,反復洗幾次后,蛋白容易掉下來,,結果較差,。尼龍膜主要通過它膜上的正電荷和蛋白接合 (注:常用的PVDF即帶正電荷的尼龍膜),同時也有疏水作用,,但相對較弱,。這樣的話,PVDF膜和蛋白接合較牢,,不易脫落,,結果較好。

Q:酸化抗體的檢測樣本制備時是否一定要加NaF等,?

A:NaF是一種廣譜磷酸化酶的抑制劑,,一般建議添加。


愛必信特色產品線(全部現貨):

二抗,、標簽抗體,、對照抗體;WB相關:ECL發(fā)光液,、預染marker,、預制膠;IHC相關:二抗試劑盒,、組化筆,;IP/CoIP試劑盒;細胞因子,、信號通路調節(jié)劑,;血清、BSA,、蛋白酶K、CTB,、TTX,、CEE;凋亡試劑盒,、呼吸爆發(fā)試劑盒,;動植物提取物...

 

愛必信(上海)生物科技有限公司

[email protected]

公眾平臺:愛必信生物

會員登錄

請輸入賬號

請輸入密碼

=請輸驗證碼

收藏該商鋪

標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
在線留言