Q:步驟上的可選步驟能否省略,?
A:該試劑盒是經(jīng)過實驗驗證的,,再進(jìn)行驗證實驗的時候?qū)嶒炇叶际且鲞@個可選步驟的,建議不要省略,,按照說明書操作,。
Q:protein A和protein G beads怎么選?
A:各5ul就可以了
Q:超聲破碎冰上操作是必須的嗎,?4℃條件能否微調(diào),?
A:建議冰上操作,4℃是可以微調(diào)的,。
Q:beads出現(xiàn)吸不出來的情況,,怎么處理?
A:吸之前需注意槍頭要剪一下再吸,,如若beads吸不上來,,可加入等體積的20%乙醇混勻后再吸。
Q:如果沒有超聲破碎儀的話,,能不能用酶解的辦法破碎細(xì)胞,?
A:酶解和超聲都是可以的,酶的濃度按照正常實驗室使用濃度就可以,。
Q:實驗的時候能抗體beads一起加嗎,?還是先加抗體再加beads?
A:都可以,,建議參考說明書使用,,先加抗體再加beads。
Q:washing buffer一定要使用配套的嗎,?
A:zui終濃度是稀釋的1*的washing buffer都可以,。
Q:怎么看出現(xiàn)的條帶結(jié)果?
A:比較關(guān)注的就是三個泳道,,input和IgG以及檢測互相作用的泳道,,理論上input有一條目的條帶,IgG沒有條帶,。如果input沒有條帶,,說明在進(jìn)行免疫共沉淀之前沒有進(jìn)行WB驗證,建議先驗證之后再從頭做。IgG陰性對照出現(xiàn)條帶的話是不正常的,,應(yīng)該是受重鏈和輕鏈的影響,,說明使用的二抗不正確,建議更換特異性更強的二抗,。
Q:免疫共沉淀試劑盒裂解液能用于組織嗎,?比例又是如何?
A:可以的,,不過要事先將組織研磨成勻漿,,比例和細(xì)胞比例一致。
愛必信免疫(共)沉淀(IP/CoIP)試劑盒:
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
abs955 | 免疫(共)沉淀(IP/CoIP)試劑盒 | 50tests |
愛必信特色產(chǎn)品線(全部現(xiàn)貨):
二抗,、標(biāo)簽抗體,、對照抗體;WB相關(guān):ECL發(fā)光液,、預(yù)染marker,、預(yù)制膠;IHC相關(guān):二抗試劑盒,、組化筆,;IP/CoIP試劑盒;細(xì)胞因子,、信號通路調(diào)節(jié)劑,;血清、BSA,、蛋白酶K,、CTB、TTX,、CEE,;凋亡試劑盒、呼吸爆發(fā)試劑盒,;動植物提取物...
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