端粒是染色體的一部分,其研究離不開分子生物學(xué)的發(fā)展,。分子生物學(xué)相關(guān)實驗,,對實驗室的衛(wèi)生環(huán)境有比較高的要求,需要達到無核酸污染的條件,。德國MB公司生產(chǎn)的核酸污染清除試劑PCR Clean,,噴霧型核酸污染清除試劑,方便高效地清除DNA,、核酸酶等污染,。
端粒酶,維持天然染色體末端端粒的酶,。端粒酶在線性染色體末端合成端粒重復(fù)序列,,允許庇護蛋白復(fù)合物結(jié)合并保護末端免受DNA損傷反應(yīng)。如果端粒酶將端粒添加到斷裂的DNA末端,,那么位于斷裂末端的基因可能會丟失,。理論上,會在雙鏈斷裂(dsb)中受到抑制,,在雙鏈斷裂中,,新端粒的形成會導(dǎo)致末端截斷,。
近日,科研人員開發(fā)了一種檢測人類細胞中Cas9或I-SceI誘導(dǎo)的DSBs中新端粒形成的方法,。
相關(guān)研究發(fā)表在《Science》上,,文章標題為:“ATR blocks telomerase from converting DNA breaks into telomeres"。
端粒酶將端粒重復(fù)序列添加到DSBs中,,導(dǎo)致間質(zhì)端粒重復(fù)插入或形成功能性新端粒并伴有末端缺失,。端粒酶對基因組完整性的威脅通過失調(diào)性毛細血管擴張和rad3相關(guān)(ATR)激酶信號傳導(dǎo)最小化,其抑制端粒酶在切除的DSBs,。除了作用于切除的DSBs外,,端粒酶還利用Cas9酶產(chǎn)物復(fù)合體中的擠壓鏈作為新端粒形成的引物。
科研人員認為,,盡管新端粒的形成在正常人類細胞中是有害的,,但它可能允許癌細胞從斷裂-融合-橋循環(huán)中逃脫。人類端粒酶可以作用于斷裂的DNA末端,,從而威脅到基因組的完整性,。研究表明,端粒酶的這種基因組不穩(wěn)定方面被DNA損傷反應(yīng)的ATR激酶成分所避免,。
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